Apakah ujian darah untuk ELISA

Perkembangan perubatan moden dalam dunia diagnostik tidak pernah berhenti mengagumkan dengan pencapaiannya, dan sekarang doktor tidak perlu membuat andaian mengenai kemungkinan diagnosis, hanya bergantung pada tanda-tanda tidak langsung. Penciptaan dan pengenalan ke dalam dunia penyelidikan makmal pengujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA) membolehkan anda menentukan dengan cepat dan tepat bukan sahaja kehadiran patogen, tetapi juga banyak ciri lain penyakit ini.

Sejarah penciptaan dan pengembangan IFA

Kaedah ujian darah ini mula digunakan dalam perubatan praktikal pada pertengahan abad yang lalu - di suatu tempat pada tahun 60-an. Tujuan awalnya adalah penyelidikan ilmiah dalam bidang histologi, yang hanya terbatas pada pencarian dan kajian struktur antigenik selular spesies biologi. Ujian darah dengan kaedah ELISA didasarkan pada interaksi antigen terkait (AG) dan antibodi spesifik (AT), dengan pembentukan kompleks "antigen-antibodi", ditentukan oleh enzim.

Fenomena ini mendorong para saintis untuk memutuskan bahawa kaedah itu dapat digunakan untuk mengenali sebatian protein dari pelbagai kelas yang terbentuk dalam serum darah ketika patogen memasuki tubuh. Oleh kerana penglibatan mereka secara langsung dalam fungsi sistem kekebalan tubuh, sebatian ini disebut imunoglobulin (Ig, Ig), dan penemuan ini merupakan penembusan terbesar dalam diagnostik makmal..

Pada masa yang sama, kaedah yang sangat sensitif ini mula digunakan secara aktif hanya pada tahun 80-an, dan hanya boleh didapati di institusi perubatan yang sangat khusus. Yang pertama dapat menggunakan penganalisis immunoassay enzim di stesen dan pusat pemindahan darah, institusi perubatan venereal dan berjangkit. Ini disebabkan oleh penyebaran "wabak abad ke-20" yang cepat - AIDS, dan tindakan diagnostik dan terapi segera diperlukan..

Kemungkinan teknik

Bidang aplikasi ujian darah untuk ELISA cukup luas - pada masa ini mustahil untuk membayangkan betapa rumitnya pencarian penyebab banyak penyakit. Penyelidikan seperti ini kini digunakan di hampir semua bidang perubatan, bahkan dalam bidang onkologi. Walaupun sulit untuk dimengerti yang tidak berpengetahuan, dalam beberapa kasus, setelah melakukannya, adalah mungkin untuk menyelamatkan nyawa pesakit, setelah menemukan tumor pada tahap awal..

Di pusat diagnostik moden, pemeriksaan makmal tidak hanya ditunjukkan oleh penanda tumor - mereka juga dilengkapi dengan panel panel yang mengagumkan untuk menjalankan diagnosis ini. Dengan pertolongan mereka, banyak keadaan patologi dapat ditentukan, seperti kelainan hormon dan proses berjangkit dari pelbagai asal..

Di samping itu, melakukan dan menyahkod ujian darah ELISA akan memungkinkan untuk mengesan kesan ubat-ubatan pada tubuh orang yang sakit dan juga haiwan. Yang terakhir digunakan secara meluas di klinik veterinar, membantu menjaga kesihatan haiwan peliharaan atau pencari nafkah kita, menyediakan bekalan daging, produk tenusu dan telur yang tidak tergantikan dalam diet..

Oleh itu, akibat mengambil hanya beberapa mililiter darah vena dan diagnosisnya menggunakan kaedah ELISA, doktor, setelah menerangkan bahan penyelidikan, dapat menentukan:

  • keadaan hormon, termasuk bahan aktif biologi gonad dan kelenjar tiroid, serta kelenjar adrenal;
  • kehadiran jangkitan bakteria dan virus (hepatitis B dan C, sifilis, herpes, klamidia, tuberkulosis, myco- dan ureaplasmosis, HIV, TORCH) dan penyakit lain seperti ini;
  • tanda-tanda aktiviti penting patogen proses patologi, yang berakhir dalam pemulihan dan melewati tahap pembentukan antibodi (tindak balas imun).

Kompleks semacam itu jauh lebih mudah dikenali dan dihilangkan oleh sel-sel imun. Kesan sisa dalam bentuk antibodi dalam banyak kes terkandung dalam darah seumur hidup, yang secara praktikal mengurangkan risiko jangkitan semula menjadi sifar.

Varieti imunoglobulin

Terdapat beberapa jenis antibodi, dan masing-masing terlibat dalam proses tindak balas imun pada tahap tertentu. Sebagai contoh, imunoglobulin kelas M (IgM) adalah yang pertama terbentuk sebagai tindak balas kepada kemasukan hipertensi ke dalam badan. Kadar tertinggi mereka diperhatikan pada hari-hari pertama penyakit ini..

Kemudian sistem imun melancarkan kelas G Ig (IgG) ke dalam plasma, yang bertanggungjawab untuk pemusnahan antigen sepenuhnya dan pemulihan pesakit. Kemudian, mereka terus berada di dalam darah, dengan itu menyediakan kekebalan untuk serangan berulang patogen yang sama. Inilah cara kerja vaksinasi. Dengan pengenalan antigen mikroorganisma patologi yang lemah, banyak imunoglobulin muncul dan tetap beredar di plasma.

Dan, seterusnya, jika berlaku kontak patogen, mereka dapat mengatasi jangkitan dengan cepat, menyelamatkan tubuh dari ancaman kesihatan. IgA tertumpu dalam jumlah besar pada selaput lendir, menyekat kemasukan virus dan bakteria patogen ke dalam badan. IgE bertanggungjawab untuk membunuh jangkitan parasit, dan terdapat banyak imunoglobulin lain yang terlibat dalam tindak balas imun.

Objek utama yang menarik untuk diagnostik makmal adalah kelas Ig M, G dan A. Dengan tahap kepekatannya, anda dapat menentukan tahap penyakit dan mengetahui penyakit berjangkit apa yang seseorang alami dalam hidupnya. Contohnya, anda boleh memeriksa sama ada terdapat sejarah cacar air atau rubella. Doktor, untuk mengetahui sama ada jenis AT atau AH tertentu terdapat di dalam badan pesakit atau kepekatan hormon apa pun, tidak perlu menetapkan beberapa pemeriksaan makmal - cukup untuk menulis rujukan untuk ELISA.

Intipati teknik

Uji imunosorben yang berkaitan dengan enzim untuk parasit dan mikroorganisma lain - perosak kesihatan tubuh memungkinkan bukan sahaja untuk membuktikan adanya patogen, tetapi juga memberitahu tentang jumlahnya dalam plasma darah pesakit. Oleh itu, kajian sedemikian memungkinkan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif mikroorganisma patogen yang terdapat dalam serum..

Tahap kepekatan patogen secara signifikan mempengaruhi perkembangan jangkitan dan kadar pemulihan, oleh itu penilaian kualitatif dianggap tidak kurang penting daripada penilaian kuantitatif. Dia diberikan jauh dari peranan terakhir dalam rawatan kanak-kanak dan orang dewasa. Tetapi bagaimana ELISA mampu mengenali pelbagai mikroorganisma yang parasit tubuh manusia dan haiwan, menyebabkan bahaya dan mengurangkan kualiti hidup??

Metodologi kajian didasarkan pada beberapa pilihan (langsung dan tidak langsung - kompetitif dan tidak kompetitif) untuk melaksanakan tugas yang diberikan, masing-masing dirancang untuk tujuan tertentu. Pendekatan ini memungkinkan untuk mencari sasaran, dan dalam waktu sesingkat mungkin untuk mengenal pasti penyebab patologi tertentu. Untuk mengesan Ig dari kategori kelas yang berlainan, plat 96 sumur (panel polistirena) digunakan, dan protein rekombinan yang diserap terletak di telaga. Mereka memainkan peranan antigen, dan pada peringkat awal berada dalam fasa pepejal.

Ketika memasuki sumur dengan plasma darah, antigen atau antibodi mengenal pasti objek yang berkaitan dengan orientasinya, dan membentuk kompleks (AG - AT). Pembentukan ini diperbaiki oleh sebatian enzim (konjugat), yang kemudian akan menampakkan dirinya sebagai pewarnaan sumur yang berubah. ELISA dihasilkan pada sistem ujian khusus yang dihasilkan di makmal khusus dan dilengkapi dengan set reagen yang lengkap.

Analisis ini dapat dilakukan pada mesin basuh - mesin cuci dan pembacaan spektrofotometer, tetapi ia memerlukan tenaga kerja manual. Sudah tentu, pembantu makmal beberapa kali lebih mudah dan pantas untuk melakukan semua manipulasi pada peranti automatik sepenuhnya. Semasa menggunakannya, kakitangan makmal dibebaskan dari sejumlah besar aktiviti monoton - mencuci, menanam dan lain-lain rutin, tetapi tidak semua institusi perubatan mampu membeli peralatan yang mahal

Tafsiran bahan penyelidikan secara eksklusif adalah kecekapan pakar diagnosis makmal - hanya dia yang dapat diberitahu hasilnya mengenai spesifik dan kehalusan perjalanan penyakit ini. Dalam kes ini, doktor mesti mengambil kira kemungkinan mendapat jawapan positif palsu atau negatif positif..

Penyahkodan bahan

Hasil imunoassay enzim berkualiti tinggi mestilah kesimpulan yang jelas - mikroorganisma yang diinginkan dijumpai atau tidak dalam sampel darah ini. Analisis kuantitatif akan menunjukkan tahap kepekatan dan dapat dinyatakan dalam dua cara - berdasarkan nilai dalam angka atau dengan bilangan tanda "+".

Petunjuk yang dianalisis

Semasa penyelidikan, kajian yang teliti terhadap imunoglobulin utama yang terlibat dalam tindak balas imun dilakukan, seperti:

  • IgM - pengesanan kelas ini bermaksud perkembangan bentuk akut penyakit berjangkit. Hasil negatif untuk mencari IgM boleh menjadi bukti ketiadaan patogen yang diinginkan, dan peralihan penyakit ke arah kronik.
  • IgA - penentuan kelas ini dalam ketiadaan IgM dalam kebanyakan kes, isyarat bentuk kronik atau pendam perkembangan penyakit berjangkit.
  • IgM dan IgA (kehadiran serentak) - hasil positif untuk kedua-dua jenis menunjukkan puncak bentuk patologi akut.
  • IgG - kehadirannya menunjukkan perubahan penyakit menjadi bentuk kronik atau dalam pemulihan dan pembentukan imuniti kepada agen yang ditentukan.

Kemunculan dan pengumpulan kelas IS tertentu berlaku pada tahap masa yang berbeza. Jadi, sebagai contoh, IgM muncul pertama, kira-kira 5 hari selepas patogen menyerang. IG kekal dalam darah selama kira-kira 5-6 minggu dan kemudian secara beransur-ansur hilang. Pada masa ini, mereka tersedia untuk ditentukan oleh ELISA. Kira-kira 3-4 minggu selepas bermulanya penyakit, IgG muncul, yang kemudiannya dapat bertahan selama beberapa bulan. Tetapi dalam analisis itu tidak selalu dijumpai.

IgA terbentuk dalam darah dalam jangka masa 2-4 minggu, sementara 20% daripadanya terkandung dalam serum, dan 80% dalam rembesan membran mukus. Sebagai peraturan, imunoglobulin ini hilang dalam 2-9 minggu, yang menunjukkan pemusnahan patogen dan pemulihan pesakit. Sekiranya ELISA masih menunjukkan kehadiran IgA, maka ini menandakan peralihan proses ke bentuk kronik..

Pilihan analisis

Bergantung pada data yang diperoleh, jawapan ELISA dapat dikeluarkan dalam bentuk berupa tabel dengan daftar lengkap semua AT dan AG dan petunjuk reaksi positif atau negatif. Dalam situasi tertentu, nilai kuantitatif akan ditunjukkan - hasil positif, positif, lemah positif atau negatif. Pilihan kedua menunjukkan jumlah antibodi yang terdapat dalam sampel darah yang dikaji.

Sebagai tambahan kepada nilai di atas, parameter kuantitatif lain disiasat dalam proses ELISA - indeks ketersediaan AT, dikira sebagai peratusan. Ini menunjukkan berapa lama penyakit ini berlanjutan - iaitu, semakin tinggi penunjuknya, semakin banyak masa patologi berkembang.

Kaedah ELISA alternatif

Uji imunisasi enzim adalah diagnosis yang cukup terkenal dan biasa. Mungkin ada yang tidak pernah mendengarnya, tetapi ada versi lain dari kajian ini, bahkan kurang diketahui oleh sebilangan besar orang, di mana sampel tidak diambil darah. Teknik ini disebut analisis tinja untuk darah ghaib, dan dalam banyak kes, ini memungkinkan anda untuk mengelakkan prosedur tambahan yang melelahkan, yang juga disertai dengan sensasi yang tidak menyenangkan..

Ujian ELISA untuk darah ghaib (molekul hemoglobin) memungkinkan untuk mengesan pendarahan sistem pencernaan, walaupun tidak signifikan, tanda-tanda di mana najis pesakit, seperti yang mereka katakan, tidak dapat dijumpai dengan mata kasar. Ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim pada tinja manusia dalam masa yang singkat dapat menunjukkan ulser peptik, poliposis, divertikulosis, tumor yang tidak disertai dengan gejala tertentu pada peringkat awal.

Setakat ini, beribu-ribu jenis sistem ujian immunoassay enzim telah dibuat, yang memberi peluang untuk mencari AT dan AG senarai besar patologi. Oleh itu, analisis ini digunakan di hampir semua cabang perubatan, untuk kategori umur apa pun. Keburukan yang mutlak membolehkan anda menggunakannya sepanjang kehamilan dan untuk diagnosis pesakit yang lemah.

Analisis ELISA: apa itu? mengapa ia diperlukan? kebaikan dan keburukan kaedah

Analisis ELISA - apa itu? Nama penuh kaedah diagnostik ini dipanggil ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim, dan berdasarkan penentuan dalam darah periferi antibodi dari pelbagai kelas, atau imunoglobulin, yang dihasilkan oleh tubuh manusia..

Dalam praktik doktor, analisis ELISA mengambil tempat yang sangat penting apabila perlu untuk mendiagnosis patologi berjangkit. Analisis ini menunjukkan bukan hanya kehadiran penyakit berjangkit, tetapi juga tahap proses patologi. Juga, tidak hanya berkaitan dengan patogen, kaedah ELISA ditunjukkan untuk digunakan: ia digunakan untuk mendiagnosis keadaan alergi. Ujian ini membolehkan anda mengenal pasti masalah dalam sistem kekebalan tubuh, dalam banyak penyakit sistem hematopoietik, autoimun dan gangguan lain.

Mengapa IFA diperlukan?

Semua penyelidik cenderung untuk mempercayai bahawa nama "antibodi" terlalu disayangkan. Namun, ia mencerminkan satu ciri penting imunoglobulin: mereka dapat mengikat dan meneutralkan bahan berbahaya, mendekati mereka seperti "kunci" ke "kunci". Jumlah antibodi dalam darah tidak hanya mencerminkan kemampuan umum tubuh untuk melawan jangkitan, tetapi juga kemampuan untuk membentuk kompleks imun yang beredar, yang dapat terjadi pada pelbagai penyakit autoimun, misalnya, dengan rheumatoid arthritis atau ankylosing spondylitis..

Kompleks antibodi dengan antigen (faktor berbahaya berjangkit) adalah hasil tindak balas badan terhadap pengenalan "orang luar". Oleh itu, sistem imun belajar mengenalinya, dengan bantuan limfosit, ia melatih sel-sel imunokompeten, dan mereka dapat menghasilkan antibodi yang sangat spesifik. Jadi, antibodi terhadap virus Epstein disusun secara berbeza daripada antibodi terhadap virus hepatitis C, atau E. coli, dan anti-HAV, atau antibodi terhadap virus hepatitis A - berbeza daripada autoantibodi ke tisu tulang rawan. Kekhususan dan kepatuhan imunoglobulin yang tinggi terhadap agen berjangkit inilah yang menjadikan penyelidikan makmal tersebut sebagai ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim sangat berharga..

Setelah hubungan antibodi dan antigen yang kuat ke dalam satu kompleks (antigen-antibodi), faktor berbahaya kehilangan keupayaannya untuk merosakkan tisu badan, dan kemudian kompleks ini dinetralkan atau dihilangkan oleh fagositosis oleh neutrofil, dan, "dicerna", meninggalkan badan.

Ujian darah ELISA dapat menunjukkan faktor patogenik tertentu yang dihadapi oleh tubuh kita, pada tahap apa proses interaksi antara tubuh dan jangkitan. Selepas kajian itu, doktor dapat membuat prognosis dengan tahap keyakinan yang tinggi, menetapkan jenis rawatan tertentu, dan dalam beberapa kes bahkan dapat menentukan jangka hayat pesakit, terutama dengan jangkitan virus kronik, misalnya, dengan hepatitis C virus.

Tetapi dalam beberapa kes, sama sekali tidak ada agen berjangkit di dalam tubuh, dan antibodi "secara tidak sengaja" menyerang organ dan tisu mereka sendiri, kerana sel yang tidak kompeten menerima maklumat palsu. Penyakit seperti itu disebut autoimun, dan enzim immunoassay juga membantu mengenali patologi kronik ini, dan membantu dalam diagnosis.

Lebih banyak mengenai imunoglobulin

Secara keseluruhan, tubuh manusia menghasilkan 5 kelas antibodi yang diketahui, yang ditetapkan Ig (yang bermaksud imunoglobulin), yang tergolong dalam kelas A, M, G, E, dan D. Kesemuanya sangat penting dalam menafsirkan hasil analisis ELISA. Sudah tentu, terdapat lebih banyak kompleks, dan tidak semuanya masih terbuka. Tetapi dalam diagnosis pelbagai penyakit, tiga jenis antibodi pertama sangat berharga. Ujian darah untuk ELISA menggunakan sebanyak mungkin maklumat: saat antibodi muncul di dalam darah, perubahan kepekatannya bergantung pada masa, tempoh hilangnya, serta jenis antibodi spesifik.

Oleh itu, peserta dalam proses infeksi akut primer adalah imunoglobulin kelas M, yang selalu menunjukkan fasa akut, walaupun dalam keadaan penyakit ini dihapuskan secara klinikal. Contoh yang tipikal adalah bentuk anikterik hepatitis B virus akut atau C. Imunisasi imunisasi untuk hepatitis akan menunjukkan bahawa seseorang mempunyai hepatitis akut, dan gejala seperti sakit di hipokondrium, mulut kering, sakit sendi dan gejala tidak spesifik lain menjadi mudah difahami.

Selepas beberapa minggu, antibodi ini dijumpai dalam kepekatan yang semakin hilang, menghasilkan imunoglobulin kelas G. Mereka ditentukan dalam darah selama berbulan-bulan, dan bahkan bertahun-tahun, dan menunjukkan pemulihan, dan kemudian ia dapat kekal seumur hidup, membentuk imuniti yang kuat. Ini menunjukkan perlindungan yang kuat terhadap antigen patogen. Jadi, antibodi kelas ini menjadikan seseorang kebal terhadap kes anthrax dan wabak berulang. Tetapi ada kalanya antibodi ini tidak mencegah kesannya yang berbahaya apabila terdapat antigen. Dalam kes ini, kita dapat membincangkan peningkatan aktiviti proses kronik..

Bagi IgE, ia memiliki aplikasi dalam diagnosis berbagai pencerobohan parasit dan keadaan alergi, dan IgD melakukan fungsi tambahan: ujian imunosorben berkait enzim memungkinkan penggunaannya dalam diagnosis kompleks asma bronkial dan keadaan autoimun. Sudah tentu, menguraikan analisis ELISA jauh lebih rumit, dan pakar - pakar imunologi dapat memberitahu lebih banyak lagi. Apakah petunjuk bahawa pesakit boleh memohon secara bebas ke makmal untuk melakukan penyelidikan?

Petunjuk untuk analisis

Pertama sekali, anda perlu memahami bahawa tidak ada analisis seperti itu - "hanya darah untuk ELISA". Terdapat analisis untuk hepatitis, ia berlaku - untuk ureaplasma, atau untuk sifilis. Oleh itu, menderma darah untuk ELISA hanya dapat disasarkan, dengan "memerintahkan" pencarian jangkitan yang diinginkan. Sangat tidak dapat difahami mengapa menderma darah dari vena, tidak tahu apa yang harus dicari. Inilah sebabnya mengapa enzim immunoassay adalah alat kuat yang penting dalam carian diagnostik. Hanya seorang doktor yang dapat menetapkan analisis ini, kerana dia sengaja mencari jangkitan yang ditandai dengan gejala ini. Orang biasa tentu saja boleh memesan 150 ujian darah dengan kaedah ELISA untuk "semua jangkitan", tetapi ini akan menjadi pendekatan yang tidak masuk akal dan mahal untuk diagnosis, mengambil ujian untuk semuanya.

Pelantikan ujian yang paling dituntut untuk penyakit dan keadaan berikut:

Pelbagai jangkitan mikroba dan virus, gejala penyakit berjangkit - ruam, demam, penyakit kuning, kelenjar getah bening, sindrom cirit-birit, disyaki penyakit kelamin.

Teknik ELISA membantu dalam penentuan ureaplasma dan mycoplasma, sifilis dan klamidia, tuberkulosis dan jangkitan sitomegalovirus, herpes, hepatitis virus dan virus Epstein-Barr. Pada masa ini, kira-kira 500 jangkitan berbeza dapat disahkan menggunakan enzim immunoassay.,

Sekiranya anda mengesyaki pencerobohan helminthik, dan adanya gejala seperti alergi, eosinofilia dalam darah, pruritus, dispepsia dan penurunan berat badan,

Baca lebih lanjut mengenai jenis penyelidikan ini dalam artikel "Ujian darah untuk cacing dan parasit: kaedah penyelidikan, ELISA, kepada siapa dan bagaimana untuk menderma?".

Semasa mengesan alergen yang menyebabkan angioedema, urtikaria, sesak nafas dan serangan asma.

Dalam kes ini, Ig E tertentu dikesan, dan terdapat keseluruhan panel alergi yang akan membantu menentukan alergen - cumi-cumi atau udang, makanan kering untuk ikan yang mengandungi daphnia, debu rumah dengan tepat. Dengan demam, kaedah ini membolehkan anda mencari dengan tepat bijirin, pokok renek atau pokok yang menyebabkan bersin musim bunga dan lakrimasi.,

  • Kaedah ini ditunjukkan untuk penyakit autoimun yang disyaki, yang dirawat oleh pakar rheumatologi,
  • Sekiranya pertumbuhan dan aktiviti tumor disyaki,
  • Dalam diagnostik kompleks keadaan imunodefisiensi dan jangkitan HIV,
  • Untuk penyakit darah dan dalam pemindahan, untuk penilaian imuniti yang komprehensif, misalnya, sebelum pemindahan hati atau ginjal.

Sekarang kami tahu mengapa anda perlu menderma darah untuk ELISA. Ketahui bagaimana kajian ini dijalankan.

Bagaimana analisis dilakukan?

Bahan klasik adalah darah vena pesakit. Tetapi jika perlu, anda boleh memeriksa pelbagai jenis cecair dan tisu: lendir, air liur, rembesan serviks, cecair serebrospinal, badan mata vitreous, kandungan tali pusat dan cairan ketuban. Penting untuk diingat bahawa mengambil pelbagai ubat, aktiviti fizikal yang berlebihan, penyalahgunaan alkohol dapat memutarbelitkan keputusan ujian..

Terdapat beberapa kaedah yang memungkinkan analisis ini. Kaedah yang paling biasa digunakan di makmal klinikal adalah kaedah fotometrik. Dalam kes ini, bahan yang ditandai dengan cat digunakan, setelah tindak balasnya, dan penandaan kompleks antigen-antibodi, warnanya berubah. Akibatnya, ketumpatan optik larutan juga berubah, dan perubahan ini berkadar langsung dengan kepekatan antibodi yang dikesan. Spektrofotometer makmal berjaya digunakan untuk mengukur penyimpangan ini.

Juga, untuk ELISA, kaedah fluorometrik digunakan, yang berdasarkan pendarfluor. Di sini juga, intensiti bahan pendarfluor yang telah menetap pada sampel yang dikaji dikira..

Akhirnya, analisis imunologi menggunakan kaedah elektrokimia untuk menentukan aktiviti enzim, yang merupakan label khusus untuk antigen dan antibodi. Enzim immunoassay sendiri selalunya melibatkan penggunaan enzim seperti alkali fosfatase, lobak peroksidase dan galactosidase. Enzim ini mampu mengikat antibodi atau antigen dan menandakannya kerana aktiviti mereka.

Kekurangan kaedah dan kebaikannya

"Kelebihan" yang jelas termasuk kos analisis demokratik, kemungkinan penggunaan penyaringannya dalam kumpulan besar populasi, misalnya, ketika memeriksa wanita hamil untuk HIV. Kaedah enzim immunoassay cukup spesifik dan boleh digunakan untuk mengawal kualiti rawatan untuk banyak penyakit. Penting agar analisis dibuat dengan cepat, dan mudah dan selamat bagi pesakit..

Namun, terdapat banyak perangkap. Jadi, jika imunoglobulin tidak dikesan, maka ini tidak bermaksud 100% ketiadaan penyakit ini. Memang, dengan latar belakang kekurangan imuniti, tubuh mungkin tidak "mempunyai kekuatan" untuk mensintesis antibodi. Sekiranya pesakit mengalami kegagalan hati yang teruk, maka hati tidak dapat mensintesis protein - blok penyusun antibodi. Dalam kes ini, hasilnya disebut seronegatif, dan pengesahan jangkitan diperlukan dengan kaedah penyelidikan langsung dan paling maju - PCR, atau reaksi berantai polimerase. Tidak seperti ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim, kaedah ini tidak menunjukkan tindak balas badan terhadap proses berjangkit (yang mungkin cacat, atau tidak ada sama sekali), dengan PCR, bahan keturunan ditentukan secara langsung, atau patogen itu sendiri berada.

Kaedah enzim immunoassay dapat memberikan kesalahan terhadap latar belakang banyak penyakit kronik, dengan latar belakang terapi imunosupresif. Dalam helminthologi dan parasitologi, ada undang-undang: hanya pengesanan parasit, atau telurnya, adalah cara yang benar-benar dipercayai untuk membuat diagnosis. ELISA dapat memberikan kaedah positif silang dan palsu, bertindak balas terhadap banyak kejadian normal dalam kehidupan pesakit.

Sebagai kesimpulan, mesti dinyatakan bahawa ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim adalah kaedah diagnosis makmal yang kuat tetapi boleh membantu banyak penyakit. Walau bagaimanapun, diagnosis harus berdasarkan banyak faktor: keluhan dan anamnesis pesakit, data pemeriksaan, dan kaedah diagnostik tambahan dan instrumental lain.

Apa itu immunoassay enzim?

Dengan kemajuan perubatan moden, adalah mungkin untuk menjalankan diagnostik yang lebih mendalam sekiranya terdapat kecurigaan terhadap patologi tertentu pada pesakit. Salah satu kaedah informatif penyelidikan makmal adalah analisis ELISA, yang dilakukan dengan metode pengambilan darah vena. Iaitu, bagi pesakit, tidak ada yang berubah secara umum. Tetapi penganalisis makmal ELISA melakukan teknik yang kompleks untuk mengkaji biomaterial yang dikumpulkan. Apa analisis ELISA dan apa kehalusan menggunakan kaedah ELISA sebagai kaedah diagnostik, kita memahami bahan di bawah.

Apa itu immunoassay enzim?

Uji imunosorben yang berkaitan dengan enzim adalah salah satu kaedah diagnosis makmal, yang hanya berdasarkan reaksi yang disebut "antigen-antibodi". Di sini perlu difahami bahawa antigen adalah sebatian protein asing (molekul) yang telah memasuki tubuh manusia dengan jangkitan parasit, virus atau lain-lain. Artinya, ia hanyalah perosak. Sebaliknya, antibodi adalah sel imun (imunoglobulin) yang melindungi tubuh manusia apabila molekul asing dijumpai di dalamnya.

Penghasilan antibodi diprovokasi oleh antigen itu sendiri, yang telah menembusi tubuh manusia. Ketika memasuki "pertempuran" untuk kesihatan tubuh, antibodi sepertinya menandakan antigen, yang dilihat oleh pembantu makmal ketika memeriksa darah. Maksudnya, dalam biomaterial yang dikumpulkan, adalah mungkin untuk melacak bukan hanya kehadiran jangkitan, tetapi juga jejaknya setelah tubuh pulih sepenuhnya..

Semasa melakukan ujian ELISA, pembantu makmal dapat melihat imunoglobulin kepada antigen berikut:

  • Immunoglobulin M (disenaraikan sebagai IgM dalam hasilnya). Mereka menunjukkan bahawa proses menular dalam badan hanya memperoleh kekuatannya. Iaitu, jangkitan itu berlaku baru-baru ini;
  • Immunoglobulin G (disenaraikan sebagai IgG). Menyumbang kepada pemusnahan antigen beberapa hari selepas pengenalan jangkitan ke dalam tubuh manusia. Immunoglobulin G boleh berada di dalam badan pesakit untuk jangka masa yang panjang, membentuk kekebalan terhadap virus tertentu;
  • Immunoglobulin E (disenaraikan sebagai IgE). Nyatakan jangkitan parasit di dalam badan. Dia juga bercakap mengenai reaksi atopik dalam alahan. Perlu diketahui bahawa ujian ELISA memberikan hasil dengan ketepatan 90% untuk jangkitan parasit;
  • Immunoglobulin A (disenaraikan sebagai IgA). Lindungi selaput lendir pesakit sebanyak mungkin.

Oleh itu, dengan menetapkan pemeriksaan imunosorben yang berkaitan dengan enzim kepada pesakit, doktor yang hadir dapat mengesan jangka masa jangkitan, tahap perkembangannya, atau mengungkapkan adanya kekebalan terhadap jangkitan tertentu..

Proses diagnostik ELISA kelihatan seperti ini:

  • Darah vena yang terkumpul dibawa ke keadaan serum darah di makmal;
  • Kemudian pembantu makmal menggunakan dulang khas dengan sel, yang masing-masing sudah mengandungi semua antigen yang diperlukan. Cukup sekadar menjatuhkan serum darah ke dalam setiap sel dan mengesan reaksi imunoglobulin (antibodi) terhadap antigen. Kehadiran reaksi "yang diinginkan" dibuktikan dengan perubahan warna bahan ujian. Selepas itu, pembantu makmal mengkaji ketumpatan optik medium yang disiasat.

Secara amnya, enzim immunoassay untuk parasit membantu mengenal pasti patologi parasit seperti itu:

  • Ascariasis dan enterobiasis (cacing gelang dan cacing kremi);
  • Trichinosis;
  • Opisthorchiasis dalam bentuk akut dan kronik;
  • Giardiasis;
  • Amebiosis;
  • Toksoplasmosis;
  • Leishmaniasis dalam bentuk apa pun.

Penting: enzim immunoassay boleh berbentuk kualitatif dan kuantitatif. Dalam kes pertama, pembantu makmal hanya mengesahkan atau membantah kehadiran bahan yang diinginkan dalam darah. Dalam kes kedua, sebagai hasil analisis, kepekatannya dalam tubuh pesakit ditunjukkan.

Kekurangan kaedah

Dengan semua kelebihan kaedah diagnostik ini, perlu difahami bahawa ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim bukanlah cara untuk mencari penyebab penyakit pesakit, tetapi hanya kaedah untuk mengesahkan diagnosis yang disarankan oleh doktor yang hadir. Oleh kerana penyelidikan tidak cukup murah, anda perlu menggunakannya dengan bijak. Lebih-lebih lagi, hasil kajian harus ditafsirkan hanya oleh pakar yang berkelayakan..

Bersedia untuk ujian parasit

Penting untuk memahami bahawa mengenal pasti parasit melalui ujian darah memerlukan beberapa persiapan dari pesakit. Jadi, sebelum menderma darah, anda mesti melakukan perkara berikut:

  • Sehari sebelum pengambilan sampel biomaterial, makanan berlemak, alkohol dan daging asap mesti dikecualikan daripada diet;
  • Darah untuk pemeriksaan imunosorben yang berkaitan dengan enzim untuk parasit dan jangkitan lain harus diambil pada waktu pagi semasa perut kosong;
  • Sebelum menderma darah, merokok dilarang sekurang-kurangnya 3-4 jam;
  • Pada hari pengambilan sampel darah, disarankan untuk tidak gugup dan tidak melakukan aktiviti fizikal yang meningkat.

Mematuhi peraturan ini akan mengelakkan hasil positif palsu untuk antibodi terhadap parasit.

Penyahkodan hasilnya

Setelah kami menyelesaikan singkatan ELISA dan apa yang telah dijumpainya, adalah wajar untuk beralih kepada penafsiran hasilnya. Penting untuk difahami di sini bahawa jika analisisnya adalah kualitatif, maka hasilnya hanya akan positif atau negatif. Maksudnya, diagnosis mengesahkan kecurigaan doktor mengenai diagnosis tertentu, atau membantahnya. Dalam kes ini, borang akan mengandungi simbol "+" atau "-", masing-masing.

Penting: keputusan ujian negatif tidak selalu menunjukkan ketiadaan jangkitan. Faktanya ialah antibodi terhadap antigen dapat terbentuk dalam 14 hari setelah jangkitan dan kemungkinan ia belum terbentuk.

Sekiranya analisis kuantitatif dijalankan, maka jenis antibodi, kuantiti dan tahap aktiviti mereka ditentukan di sini. Khususnya, dengan diagnosis seperti itu, antibodi (imunoglobulin) IgG dan IgM ditentukan, yang terbentuk pada masa berlainan perkembangan jangkitan. Hasil yang paling biasa dalam kes ini adalah:

  • Peningkatan IgM dan ketiadaan IgG sepenuhnya. Gambar ini menunjukkan jangkitan baru-baru ini dan fasa akut patologi..
  • Peningkatan aktiviti kedua-dua jenis imunoglobulin (IgM dan IgG). Bercakap mengenai proses jangka panjang yang lama dan kronik.
  • Aktiviti IgG dan ketiadaan IgM sepenuhnya. Jangkitannya sekurang-kurangnya enam bulan lalu dan sekarang virus ini berada pada tahap kronik yang berlarutan.
  • Kekurangan antibodi IgG dan IgA. Hasil tidak ditentukan.
  • Ketiadaan antibodi IgM, IgA dan IgG. Menunjukkan kekurangan imuniti terhadap jangkitan tertentu.
  • Aktiviti antibodi IgG, IgM dan IgA menunjukkan peningkatan proses kronik.

Sebagai tambahan untuk mengenal pasti jenis antibodi, pembantu makmal dalam lajur khas borang menunjukkan bilangan mereka pada jumlah darah. Ingatlah, setelah memahami apa kaedah ELISA, jangan menafsirkan hasilnya sendiri. Hasil yang diperoleh hanya dapat ditafsirkan dengan tepat oleh doktor yang hadir, bergantung pada dugaan diagnosis, yang dibuat berdasarkan gambaran klinikal pesakit..

Ujian darah ELISA

Pemeriksaan imunosorben berkait enzim (ELISA) dilakukan untuk penilaian menyeluruh mengenai fungsi perlindungan badan. Dalam kajian ini, bilangan dan sifat sel imun, kehadiran antibodi yang diperlukan ditentukan. Ujian darah ELISA dilakukan untuk mendiagnosis penyakit berjangkit, hematologi, autoimun, imunodefisiensi primer dan sekunder. Pertimbangkan apa yang menjadi ujian darah ELISA, dan apa petunjuk yang ada untuk kajian ini.

Apa ini

Ujian darah ELISA adalah ujian makmal yang mengesan antibodi atau antigen dalam sampel darah. Kajian ini digunakan untuk mengesan tahap imunoglobulin, kompleks imunologi, hormon.

Petunjuk untuk analisis

Untuk temujanji ujian darah ELISA, terdapat petunjuk berikut:

  • diagnosis jangkitan kelamin - ureaplasma, mycoplasma, klamidia, trichomonas, sifilis;
  • diagnosis penyakit virus - sitomegalovirus, herpes, hepatitis, virus Epstein-Barr;
  • penentuan tahap hormon;
  • diagnostik penyakit onkologi;
  • definisi imunodefisiensi;
  • diagnosis alahan;
  • pemeriksaan komprehensif sebelum operasi sebelum pemindahan organ;
  • penilaian keberkesanan terapi.

Prinsip kaedah

Prinsip operasi kaedah pengujian imunosorben berkait enzim adalah berdasarkan penentuan antibodi protein spesifik dalam darah - imunoglobulin. Imunoglobulin dihasilkan oleh sistem imun manusia apabila antigen (mikroorganisma asing) memasuki badan. Molekul imun ini mengikat dan meneutralkan banyak agen berjangkit dalam badan..

Imunoglobulin mempunyai ciri penting - kekhususan. Berkat ini, mereka dapat mengikat antigen tertentu, membentuk kompleks antigen-antibodi. Semasa ujian darah ELISA, kompleks inilah yang ditentukan secara kualitatif dan kuantitatif.

Terdapat lima kelas imunoglobulin. Tetapi biasanya tiga kelas ditentukan - imunoglobulin A, M, G. Antibodi ini berkumpul di dalam badan pada masa yang berbeza dari saat jangkitan.

  • Imunoglobulin kelas M (IgM) muncul dalam darah pertama pada hari kelima dari saat jangkitan. Mereka kekal di dalam badan selama 5-6 minggu, kemudian hilang dari aliran darah. Antibodi IgM menunjukkan tempoh akut penyakit atau pemburukan penyakit semasa kroniknya.
  • Kira-kira 3-4 minggu selepas jangkitan, imunoglobulin kelas G (IgG) muncul di dalam darah. Mereka boleh wujud dalam darah manusia selama beberapa bulan atau bahkan bertahun-tahun. Menurut transkrip ujian darah ELISA, jika jumlah imunoglobulin IgG meningkat dalam dua sampel darah yang diambil berturut-turut dua minggu kemudian, mereka berbicara mengenai jangkitan atau jangkitan semula semasa - jangkitan semula dengan jangkitan yang sama.
  • Imunoglobulin kelas A (IgA) dapat dikesan dengan kaedah penyelidikan ini 2-4 minggu selepas jangkitan atau pemburukan penyakit berjangkit. Dari jumlah tersebut, hanya 20% yang beredar di dalam darah, selebihnya berada dalam rembesan membran mukus. Antibodi IgA hilang dari aliran darah dalam 2-8 minggu selepas pemusnahan agen berjangkit. Kehilangan imunoglobulin ini bermaksud penyembuhan jangkitan. Sekiranya, setelah berakhirnya penyakit ini, kehadiran antibodi IgA dalam darah ditentukan, maka penyakit ini telah memasuki tahap kronik.

Persediaan untuk analisis

Untuk analisis darah dengan ELISA, darah manusia paling kerap digunakan. Tetapi anda juga boleh memeriksa kandungan badan vitreous, cecair serebrospinal, cairan amniotik.

Sampel darah untuk penyelidikan diambil dari urat kubital pesakit. Dianjurkan untuk menderma darah semasa perut kosong (sekurang-kurangnya 12 jam harus berlalu sejak makan terakhir). Adalah perlu untuk memberitahu doktor jika pesakit mengambil ubat, kerana sebilangan dari mereka dapat mengubah hasil ujian. Kebolehpercayaan hasil kajian dipengaruhi oleh pengambilan alkohol dan ubat-ubatan.

Penyahkodan

Bentuk hasil analisis ini menunjukkan hasil positif (+) atau negatif (-) dari penentuan setiap kelas imunoglobulin.

Pertimbangkan tafsiran kemungkinan penafsiran ujian darah ELISA.

  • Hasil IgM, IgG, IgA negatif - kekurangan imuniti terhadap jangkitan.
  • IgM negatif, IgA dan IgG positif - imuniti selepas jangkitan atau pasca vaksinasi.
  • IgG negatif, positif, IgA dan IgM positif - jangkitan akut.
  • Hasil positif IgM, IgG, IgA - pemburukan penyakit berjangkit kronik.
  • IgM negatif dan IgG negatif atau positif, IgA - jangkitan kronik.
  • Hasil IgM negatif dan IgG tidak dapat dikesan, pemulihan IgA.

Kelebihan kaedah

Ujian darah ELISA mempunyai banyak kelebihan. Yang utama dapat dibezakan:

  • ketepatan (kepekaan) yang agak tinggi;
  • kemungkinan diagnosis awal;
  • keupayaan untuk mengesan dinamika proses berjangkit;
  • tahap penyatuan yang tinggi, yang memungkinkan untuk pemeriksaan massa;
  • jangka masa yang pendek yang diperlukan untuk mendapatkan hasil analisis;
  • kemudahan penggunaan;
  • automasi semua peringkat analisis;
  • kos yang agak rendah.

keburukan

Kelemahan ELISA ialah kadangkala memberikan hasil positif palsu atau negatif palsu. Sebagai tambahan kepada kesilapan teknikal semasa kajian, penyebab hasil yang salah mungkin adalah faktor reumatoid pesakit, kehadiran penyakit kronik (di mana antibodi dihasilkan), gangguan metabolik, dan pengambilan ubat-ubatan tertentu.

Ujian darah ELISA untuk parasit

Dengan menggunakan kaedah ujian darah ini, kehadiran proses parasit berikut di dalam badan ditentukan:

  • ascariasis;
  • trichinosis - analisis dilakukan beberapa kali, tahap maksimum antibodi ditentukan pada 4-12 minggu selepas jangkitan;
  • cysticercosis;
  • teniasis;
  • fascioliasis - antibodi ditentukan pada peringkat akut penyakit;
  • opisthorchiasis - menjalankan diagnosis pembezaan antara bentuk penyakit kronik dan akut;
  • giardiasis;
  • leishmaniasis viseral dan kulit;
  • amebiasis;
  • toksoplasmosis.

Ujian darah ELISA untuk parasit digunakan untuk mengesan antigen (parasit dan produk metaboliknya) dan antibodi (imunoglobulin). Imunoglobulin dihasilkan di dalam badan sebagai antibodi terhadap antigen. Kekhususan kaedah ini dalam menentukan parasit adalah 90%. Dengan bantuan analisis ini, adalah mungkin untuk menentukan jenis parasit, bilangannya, dan, berkat tahap antibodi, untuk mengesan dinamika perkembangan proses.

ELISA: bagaimana analisis dilakukan? Kos. Penyahkodan hasilnya

Kaedah analisis dengan ketepatan tinggi adalah bahagian penting dalam perubatan moden dan, khususnya, diagnostik. Kaedah diagnostik yang ada pada masa ini memungkinkan untuk mengenal pasti tepat pada masanya bukan hanya fakta kehadiran, tetapi juga jumlah parasit di dalam tubuh pesakit..

Sekarang, sebagai peraturan, pesakit ditawarkan hanya menjalani satu ujian - enzim immunoassay.

Permohonan ujian darah ELISA

Immunoassay adalah jenis analisis yang sangat khusus yang dijalankan di makmal. Analisis ini didasarkan pada tindak balas badan, yang biasanya disebut sebagai "antigen-antibodi".

Kaedah analisis berdasarkan indikator ini memberikan ketepatan 99%. Ini adalah kaedah paling tepat yang diketahui sekarang. Dalam praktiknya, hampir tidak ada kes ketika analisis semacam itu memberikan hasil yang salah..

Kaedah ini membolehkan anda mengenal pasti:

  • sebilangan besar penyakit berjangkit yang disebabkan oleh parasit;
  • kehadiran pelbagai jenis penanda tumor;
  • dalam perubatan pembiakan - kehadiran protein, hormon dan peptida yang diperlukan untuk menilai kesuburan pesakit;

Kebolehpercayaan hasil ujian bergantung kepada beberapa faktor:

  • sejenis parasit tertentu;
  • bilangan parasit di dalam badan;
  • kadar pembiakan mereka.

Bilakah analisis jenis ini digunakan??

Enzim immunoassay digunakan secara meluas dalam diagnosis pelbagai penyakit. Nilai utamanya ialah ia membolehkan anda mengenal pasti penyakit yang tidak simptomatik.

Seperti yang anda ketahui, penyakit seperti itu sering bermasalah untuk dikesan pada peringkat awal dan, oleh itu, mula dirawat tepat pada waktunya..

Penyakit apa yang didiagnosis menggunakan enzim immunoassay:

  • penyakit onkologi;
  • jangkitan kelamin (HIV, klamidia, sifilis, ureaplasmosis, herpes dan penyakit lain);
  • batuk kering, campak, toksoplasmosis, hepatitis, dan sebagainya;
  • hormon tiroid;
  • hormon seks;
  • pelbagai gangguan autoimun;
  • reaksi alergi dan intoleransi terhadap makanan tertentu.

Faktor apa yang berdasarkan ELISA?

Prosedur ini membantu mengenal pasti:

  • jangkitan badan dengan bakteria dan virus;
  • asas protein;
  • pencerobohan helminthik;
  • badan asing.

Sebenarnya, prosedur ELISA terdiri daripada dua bahagian:

  1. tindak balas imun;
  2. tindak balas enzimatik.

Inti dari prinsip "antigen-antibodi" adalah bahawa agen penyebab penyakit atau benda asing, iaitu, antigen, memasuki tubuh secara beransur-ansur bersama dengan sumber jangkitan. Proses ini mencetuskan tindak balas imun yang disebut, yang dirancang untuk melindungi tubuh dari unsur asing..

Manifestasi perlindungan tersebut bergantung pada antigen itu sendiri dan pada gejala penyakit yang disebabkan olehnya. Skema ini disebut "antigen-antibodi".

Untuk kebolehpercayaan diagnostik yang lebih besar, keseluruhan prosedur immunoassay enzim dilakukan hanya di makmal dan pusat perubatan. Pelbagai antigen dan antibodi berinteraksi dengan sampel darah.

Untuk mengenal pasti jenis dan kuantiti parasit dalam tubuh pesakit, imunoglobulin kelas "A" dan "E" digunakan, yang bertindak balas terhadap serangan parasit.

Analisis sedemikian harus menunjukkan:

  • IgM;
  • IgA;
  • IgG;

Apakah tindak balas imun dan bagaimana pengenalan antigen ditentukan?

Tindak balas imun menunjukkan ikatan biologi dalam molekul sel mikroba, yang mana analisisnya dijalankan. Tindak balas imun hanya merupakan salah satu komponen program ELISA yang komprehensif, sementara komponen kedua adalah reaksi enzimatik.

Pengecaman antigen berlaku semasa hubungan sel sel sistem imun (imunosit) dengan sel asing. Ciri-ciri individu antigen berfungsi sebagai alat untuk mengenali "kawan atau musuh" untuk sistem imun.

Apa itu antibodi?

Sebenarnya, antibodi:

  • Ia hanyalah molekul yang terletak di permukaan imunosit..
  • Molekul ini digunakan untuk mengenali sel asing..

Penyebaran maklumat yang diterima mengenai antigen berlaku pada tahap sel. Sambungannya hancur jika sel kebal, jika tidak, tubuh melancarkan reaksi pertahanan semula jadi.

Sains moden mengetahui 5 kelas antibodi, yang disebut imunoglobulin atau struktur protein.

Huruf Latin digunakan untuk menunjukkan antibodi: A, D, E, G dan M.

Dalam hasil analisis, sebutan ini kelihatan seperti ini:

  • IgA;
  • IgD;
  • IgE
  • IgG;
  • IgM.

Prosedur immunoassay enzim

Pertama sekali, perlu menyediakan plat polistirena khas yang mengandungi 96 telaga. Sebelum analisis, dinding setiap sel dirawat dengan antigen yang menyerap.

Serum darah menetes ke sel yang dirawat. Antibodi homogen dan antigen bertindak balas antara satu sama lain untuk membentuk ikatan yang kuat. Mayat yang tidak dilampirkan dibasuh. Kemudian antibodi imunoglobulin ditambahkan ke dalam sumur bersama dengan unsur enzim berlabel khas.

Reagen dilabel untuk memudahkan pengenalan antibodi dalam serum yang dianalisis. Unsur kromogenik yang mempercepat tindak balas dan mewarnai telaga ditambahkan setelah dibilas. Keamatan warna jika dibandingkan dengan enzim yang dikaji menunjukkan peratusan antigen dalam sampel darah.

Juruteknik kemudian menggunakan cecair optik untuk:

  • mengukur kepekatan antibodi di telaga;
  • membandingkan hasil yang diperoleh dengan sampel kawalan, iaitu standard;
  • hitung kepekatan antibodi menggunakan skala khas.

Untuk menganalisis pencerobohan helminthik, digunakan versi khas sistem ujian, dengan set indikator norma dan penyimpangannya sendiri.

Persediaan untuk analisis

Pensampelan serum darah untuk immunoassay enzim dilakukan hanya di makmal. Mereka mengambil darah dari urat, mengeluarkan unsur-unsur dari sana yang dapat mempengaruhi proses analisis dan ketepatan hasilnya. Lakukan analisis pada waktu pagi semasa perut kosong.

Menyahkod keputusan enzim immunoassay

Kualiti dan kuantiti antibodi menunjukkan adanya unsur asing di dalam tubuh pesakit, termasuk patogen. Tanda-tanda yang sama menunjukkan bahawa proses keradangan telah bermula di dalam badan..

Contoh penyahkodan hasil ELISA:

Tahap penyakitIgAIgMIgG
Primer (2 minggu selepas jangkitan)+--
Primer (2.5-3 minggu dari saat jangkitan)++-
Primer (3-4 minggu dari saat jangkitan)+++
Eksaserbasi fasa kronik (2 minggu dari permulaan eksaserbasi)+-+
Kronik+/--+
Masa lalu (jangkitan sembuh)--+
PemulihanTiter menurun 2-4 kali setelah berjaya menjalani rawatan-Titer menurun 4-8 kali selepas 1-1.5 bulan setelah berjaya menjalani rawatan
Hasilnya adalah negatif---

Dengan sendirinya, analisis kuantitatif yang dilakukan dengan kaedah ini belum memungkinkan untuk mendiagnosis penyakit secara tepat, menetapkan rawatan dan menentukan dos ubat..

Kebaikan dan keburukan ELISA

Semua kaedah ujian, bahkan yang paling maju dan sangat tepat, sayangnya, selain daripada kelebihannya, mempunyai kekurangannya..

Kebaikan imunisasi enzim:

  • Pengkhususan kaedah diagnostik;
  • Peningkatan kepekaan kaedah ini;
  • Penerapan teknologi terkini.

Sensitiviti kaedah diagnostik adalah kebarangkalian tinggi untuk mencari kaedah yang diinginkan, walaupun kepekatannya dalam bahan ujian sangat rendah.

Kekhususan teknik bermaksud:

    tahap kebolehpercayaan yang tinggi, iaitu, tidak ada risiko mendapat hasil yang salah. Sekiranya hasilnya positif, maka pesakit dijamin bahawa jenis parasit yang tepat dari mana dia menderita dijumpai;

  • kesan pada hasil "faktor manusia", iaitu kemungkinan kesalahan pembantu makmal, dikurangkan menjadi sifar, yang juga menyumbang kepada peningkatan ketepatan.
  • Kemungkinan kelemahan kaedah analisis ini:

    1. Ini mengandaikan penentuan sifat penyakit, iaitu, mustahil untuk "meneka" secara intuitif diagnosis yang tepat dalam kes ini;
    2. Kos analisis yang tinggi.

    Perbandingan immunoassay duodenal dan enzim langsung

    Prosedur ELISA secara langsung menggunakan kemampuan antibodi untuk mencari antigen dengan membentuk ikatan dengan label. Kaedah analisis ini dianggap industri, masa menunggu hasilnya tidak lebih dari satu jam.

    Label substrat khas muncul selepas penapaian. Tahap antibodi sesuai dengan bahagian antigen dalam biomaterial yang dikaji.

    Terdapat juga kaedah penyelidikan duodenal (sebaliknya - tidak langsung) untuk pencerobohan parasit, yang banyak digunakan, walaupun ketepatan ELISA yang tinggi.

    Imunoassay enzim duodenal (tidak langsung) dilakukan dalam 2 peringkat:

    1. Pertama, antibodi berlabel dibandingkan dengan antigen yang dikehendaki;
    2. Sapukan antibodi berlabel pada antibodi tanpa label yang terdapat pada tahap sebelumnya.

    Oleh itu, kawalan dua kali ganda antigen dan antibodi dicapai, meningkatkan kebolehpercayaan analisis.

    Dengan ELISA tidak langsung di makmal, antigen terpaku pada permukaan telaga, ia membentuk ikatan dengan bahagian antibodi yang tidak berlabel.

    Kelebihan kaedah duodenal:

    • Penguasaan dua kali ganda terhadap biomaterial yang dikaji, yang meningkatkan ketepatan dengan ketara;
    • Peningkatan ketepatan dan kekhususan kaedah analisis itu sendiri.

    Walau bagaimanapun, kaedah ini memerlukan banyak masa dan melibatkan beberapa langkah tambahan. Walau bagaimanapun, ketepatan kajian ini sangat tinggi sehingga membenarkan kelemahan ini. Atas sebab ini, kebanyakan doktor mengesyorkan kaedah analisis duodenum..

    Ke mana hendak pergi, berapa lama menunggu dan berapa banyak yang perlu dibayar?

    Sekiranya anda mempunyai semua alat dan barang keperluan, anda boleh mendapatkan hasilnya dalam 2 hari selepas penghantaran. Sekiranya makmal mempunyai perkhidmatan analisis ekspres, maka sampel dapat diproses hanya dalam 3-5 jam.

    Di mana saya boleh mengambil ELISA:

    • di klinik negeri;
    • di klinik swasta.

    Harga untuk enzim immunoassay secara langsung bergantung pada tahap harga di klinik tertentu, rata-rata, harganya sekurang-kurangnya 4000 rubel.

    Maklumat yang diperoleh dari kajian ini dapat menjadi sumbangan yang berguna untuk sains perubatan, namun, pesakit harus ingat bahawa kerana biaya imunisasi enzim sangat tinggi, lebih bijak untuk mempercayakan prosedur ini ke klinik yang dapat diperiksa dan diuji masa..

    Malangnya, institusi perubatan negeri tidak selalu dilengkapi dengan sains terkini. Peranti yang diperlukan untuk pengambilan sampel biomaterial berkualiti tinggi dan pemprosesannya di klinik daerah mungkin tidak tersedia.

    Oleh itu, bagaimana enzim immunoassay berguna untuk pesakit:

    • membolehkan anda mengesan pencerobohan helminthik pada peringkat awal;
    • akibatnya, ia membolehkan anda memulakan rawatan tepat pada masanya;
    • kestabilan kaedah memungkinkan untuk menjalankan analisis dengan ketepatan yang sama pada kanak-kanak dan orang dewasa.

    Enzim immunoassay menunjukkan bukan hanya faktor kualitatif, tetapi juga faktor kuantitatif, yang bukan hanya menunjukkan fakta adanya helminths dalam tubuh pesakit, tetapi juga memungkinkan untuk menganggarkan jumlah mereka.