Ujian darah imunoassay dengan penyahkodan petunjuk

Pada masa kini, terdapat banyak jenis ujian darah yang boleh digunakan oleh doktor untuk menentukan status kesihatan pesakit. Mengapa analisis ELISA menjadi keutamaan di dalamnya, baca dalam artikel ini.

Ujian darah ELISA

ELISA (ujian imunosorben berkaitan enzim) dilakukan dalam keadaan makmal untuk mengenal pasti tahap perlindungan badan, iaitu fungsinya. Semasa prosedur ini, pakar dapat menentukan sifat dan jumlah sel, serta kehadiran antibodi di dalam badan. Ujian semacam itu dapat dilakukan untuk mendiagnosis penyakit autoimun, hematologi, atau penyakit berjangkit..

Jadi apa itu ELISA? Semasa pemeriksaan ini, antibodi dalam darah dapat dikesan. Boleh juga dilakukan untuk mengesan tahap hormon atau kompleks imunologi yang lain.

Untuk melakukan ujian darah ELISA seperti itu, mesti ada petunjuk tertentu untuk ini. Mereka biasanya dikenal pasti oleh doktor yang menjalankan rawatan..

Darah boleh diambil untuk analisis dalam kes seperti:

  1. Untuk mendiagnosis jangkitan yang boleh menular seksual (sifilis, klamidia, dll.).
  2. Untuk mendiagnosis kehadiran jangkitan virus (hepatitis, herpes, dll.).
  3. Untuk mengenal pasti kuantiti dan kualiti hormon dalam badan.
  4. Untuk mendiagnosis barah.
  5. Untuk menentukan tahap imunodefisiensi.
  6. Untuk mendiagnosis badan untuk kehadiran penyakit tertentu semasa pemindahan organ.
  7. Untuk menilai keberkesanan terapi.

Prinsip analisis ini berdasarkan fakta bahawa ia dapat mengesan imunoglobulin (antibodi protein) di dalam badan. Tubuh seperti itu dihasilkan oleh tubuh, iaitu sistem kekebalan tubuh, ketika jangkitan masuk ke dalam tubuh. Bahan seperti yang dihasilkan oleh tubuh mampu mengikat patogen dan meneutralkannya dalam prosesnya..

Klasifikasi antibodi yang melawan jangkitan di dalam badan

Immunoglobulin mempunyai ciri khas. Inilah kekhususan yang menjadikannya berbeza dengan antibodi lain. Oleh kerana kemampuan ini, mereka dapat mengikat antigen lain, membentuk antibodi kompleks. Semasa analisis ELISA, badan sedemikian dapat dikenal pasti dalam darah. Pada masa ini, pakar membezakan antara lima jenis imunoglobulin.

Biasanya mereka dibahagikan kepada tiga kelas:

  1. DAN.
  2. M.
  3. G.

Antibodi semacam itu dapat terkumpul di dalam tubuh manusia apabila jangkitan masuk ke dalamnya. Lebih-lebih lagi, mereka muncul pada masa yang berlainan setelah jangkitan..

Yang pertama yang muncul dalam darah setelah jangkitan adalah antibodi kelas M. Ia terbentuk pada hari kelima setelah jangkitan. Mereka berada di dalam badan selama 20-24 hari, dan kemudian mereka hilang. Antibodi semacam itu mungkin menunjukkan bahawa jangkitan di dalam badan adalah akut atau sudah memasuki tahap kronik. Ini memaklumkan kepada doktor untuk memulakan proses rawatan dengan segera..

Dalam 20-25 hari setelah bermulanya jangkitan, badan G muncul di dalam diri seseorang selama dua tahun. Sekiranya, semasa lulus ujian dua kali berturut-turut, antibodi ini dikesan dalam darah (selang antara analisis adalah 2-3 minggu), maka ini memberitahu doktor bahawa jangkitan di dalam tubuh berulang. Maksudnya, seseorang sekali lagi dijangkiti jangkitan serupa..

Baca juga mengenai topik ini

Mayat Kelas A boleh dijumpai di dalam badan 2-3 minggu selepas jangkitan atau pemburukan penyakit. Perlu diingatkan di sini bahawa hanya 20% dari badan-badan ini yang dapat berada dalam darah. Selebihnya pada masa ini akan terletak pada selaput lendir. Antibodi seperti itu hilang sepenuhnya 3-7 minggu setelah menghancurkan badan jangkitan. Sekiranya mereka tidak dijumpai di dalam badan semasa analisis, maka ini menunjukkan bahawa tidak ada jangkitan di dalam badan. Sekiranya, untuk jangka waktu tertentu, antibodi ini masih terdapat di dalam badan, maka ini mungkin menunjukkan bahawa penyakit ini sudah menjadi kronik.

Untuk menguji ELISA, darah diambil dari pesakit. Anda juga boleh menjalankan kajian ini dan ketika mengambil bahan lain, misalnya, cairan ketuban atau bahan tulang belakang. Darah biasanya diambil dari urat untuk ujian.

Pakar menasihatkan melakukan ujian ini semasa perut kosong. Selepas makan, 10-12 jam harus berlalu. Sekiranya pelanggan menggunakan sebarang ubat semasa lulus ujian ELISA, dia mesti memberitahu doktornya mengenai perkara ini. Ini boleh mempengaruhi ketepatan ujian. Kesahan ujian dipengaruhi oleh alkohol atau dadah. Mereka tidak boleh dimakan selama 3-5 hari sebelum ujian..

Setelah membuat kajian mengenai bahan yang dihantar, doktor membuat diagnosis. Ia boleh menjadi positif (+) atau negatif (-). Penilaian sedemikian dibuat untuk setiap kelas imunoglobulin..

Kelebihan ujian darah ELISA

Pakar perhatikan bahawa ujian darah jenis ini adalah yang paling biasa dan popular pada masa ini. Ia mempunyai banyak kelebihan berbanding jenis ujian lain..

Berikut adalah beberapa daripadanya:

  1. Keupayaan untuk mendiagnosis darah pada peringkat awal penyakit.
  2. Ketepatan kajian.
  3. Mengesan trend jangkitan.
  4. Keupayaan untuk melakukan penyelidikan besar-besaran, kerana tahap penyatuan tinggi di sini.
  5. Akan memerlukan sedikit masa untuk mendapatkan hasil yang paling tepat dan tepat..
  6. Analisis mudah.
  7. Automasi beberapa proses di makmal.
  8. Kos ujian yang rendah.

Kaedah diagnosis ini juga mempunyai kekurangannya. Ini termasuk fakta bahawa keputusan ujian kadangkala salah. Tidak kira sama ada positif atau negatif. Kesalahan seperti itu berlaku disebabkan oleh sebab teknikal atau kegagalan yang boleh disebabkan oleh peralatan. Juga, ketidaktepatan hasilnya bergantung pada keadaan kesihatan pesakit, misalnya, apakah dia menderita penyakit kronik atau mengambil ubat tertentu.

Perlu diperhatikan bahawa pengkhususan doktor juga mempengaruhi kualiti ujian. Oleh itu, disarankan agar semua ujian dilakukan dan dijalankan hanya dengan kehadiran doktor yang berkelayakan dan dalam keadaan makmal. Mengetahui perkara ini, akan lebih mudah bagi anda untuk membuat keputusan yang tepat sekiranya anda perlu menderma darah untuk ujian ELISA..

Ujian darah ELISA

Pemeriksaan imunosorben berkait enzim (ELISA) dilakukan untuk penilaian menyeluruh mengenai fungsi perlindungan badan. Dalam kajian ini, bilangan dan sifat sel imun, kehadiran antibodi yang diperlukan ditentukan. Ujian darah ELISA dilakukan untuk mendiagnosis penyakit berjangkit, hematologi, autoimun, imunodefisiensi primer dan sekunder. Pertimbangkan apa yang menjadi ujian darah ELISA, dan apa petunjuk yang ada untuk kajian ini.

Apa ini

Ujian darah ELISA adalah ujian makmal yang mengesan antibodi atau antigen dalam sampel darah. Kajian ini digunakan untuk mengesan tahap imunoglobulin, kompleks imunologi, hormon.

Petunjuk untuk analisis

Untuk temujanji ujian darah ELISA, terdapat petunjuk berikut:

  • diagnosis jangkitan kelamin - ureaplasma, mycoplasma, klamidia, trichomonas, sifilis;
  • diagnosis penyakit virus - sitomegalovirus, herpes, hepatitis, virus Epstein-Barr;
  • penentuan tahap hormon;
  • diagnostik penyakit onkologi;
  • definisi imunodefisiensi;
  • diagnosis alahan;
  • pemeriksaan komprehensif sebelum operasi sebelum pemindahan organ;
  • penilaian keberkesanan terapi.

Prinsip kaedah

Prinsip operasi kaedah pengujian imunosorben berkait enzim adalah berdasarkan penentuan antibodi protein spesifik dalam darah - imunoglobulin. Imunoglobulin dihasilkan oleh sistem imun manusia apabila antigen (mikroorganisma asing) memasuki badan. Molekul imun ini mengikat dan meneutralkan banyak agen berjangkit dalam badan..

Imunoglobulin mempunyai ciri penting - kekhususan. Berkat ini, mereka dapat mengikat antigen tertentu, membentuk kompleks antigen-antibodi. Semasa ujian darah ELISA, kompleks inilah yang ditentukan secara kualitatif dan kuantitatif.

Terdapat lima kelas imunoglobulin. Tetapi biasanya tiga kelas ditentukan - imunoglobulin A, M, G. Antibodi ini berkumpul di dalam badan pada masa yang berbeza dari saat jangkitan.

  • Imunoglobulin kelas M (IgM) muncul dalam darah pertama pada hari kelima dari saat jangkitan. Mereka kekal di dalam badan selama 5-6 minggu, kemudian hilang dari aliran darah. Antibodi IgM menunjukkan tempoh akut penyakit atau pemburukan penyakit semasa kroniknya.
  • Kira-kira 3-4 minggu selepas jangkitan, imunoglobulin kelas G (IgG) muncul di dalam darah. Mereka boleh wujud dalam darah manusia selama beberapa bulan atau bahkan bertahun-tahun. Menurut transkrip ujian darah ELISA, jika jumlah imunoglobulin IgG meningkat dalam dua sampel darah yang diambil berturut-turut dua minggu kemudian, mereka berbicara mengenai jangkitan atau jangkitan semula semasa - jangkitan semula dengan jangkitan yang sama.
  • Imunoglobulin kelas A (IgA) dapat dikesan dengan kaedah penyelidikan ini 2-4 minggu selepas jangkitan atau pemburukan penyakit berjangkit. Dari jumlah tersebut, hanya 20% yang beredar di dalam darah, selebihnya berada dalam rembesan membran mukus. Antibodi IgA hilang dari aliran darah dalam 2-8 minggu selepas pemusnahan agen berjangkit. Kehilangan imunoglobulin ini bermaksud penyembuhan jangkitan. Sekiranya, setelah berakhirnya penyakit ini, kehadiran antibodi IgA dalam darah ditentukan, maka penyakit ini telah memasuki tahap kronik.

Persediaan untuk analisis

Untuk analisis darah dengan ELISA, darah manusia paling kerap digunakan. Tetapi anda juga boleh memeriksa kandungan badan vitreous, cecair serebrospinal, cairan amniotik.

Sampel darah untuk penyelidikan diambil dari urat kubital pesakit. Dianjurkan untuk menderma darah semasa perut kosong (sekurang-kurangnya 12 jam harus berlalu sejak makan terakhir). Adalah perlu untuk memberitahu doktor jika pesakit mengambil ubat, kerana sebilangan dari mereka dapat mengubah hasil ujian. Kebolehpercayaan hasil kajian dipengaruhi oleh pengambilan alkohol dan ubat-ubatan.

Penyahkodan

Bentuk hasil analisis ini menunjukkan hasil positif (+) atau negatif (-) dari penentuan setiap kelas imunoglobulin.

Pertimbangkan tafsiran kemungkinan penafsiran ujian darah ELISA.

  • Hasil IgM, IgG, IgA negatif - kekurangan imuniti terhadap jangkitan.
  • IgM negatif, IgA dan IgG positif - imuniti selepas jangkitan atau pasca vaksinasi.
  • IgG negatif, positif, IgA dan IgM positif - jangkitan akut.
  • Hasil positif IgM, IgG, IgA - pemburukan penyakit berjangkit kronik.
  • IgM negatif dan IgG negatif atau positif, IgA - jangkitan kronik.
  • Hasil IgM negatif dan IgG tidak dapat dikesan, pemulihan IgA.

Kelebihan kaedah

Ujian darah ELISA mempunyai banyak kelebihan. Yang utama dapat dibezakan:

  • ketepatan (kepekaan) yang agak tinggi;
  • kemungkinan diagnosis awal;
  • keupayaan untuk mengesan dinamika proses berjangkit;
  • tahap penyatuan yang tinggi, yang memungkinkan untuk pemeriksaan massa;
  • jangka masa yang pendek yang diperlukan untuk mendapatkan hasil analisis;
  • kemudahan penggunaan;
  • automasi semua peringkat analisis;
  • kos yang agak rendah.

keburukan

Kelemahan ELISA ialah kadangkala memberikan hasil positif palsu atau negatif palsu. Sebagai tambahan kepada kesilapan teknikal semasa kajian, penyebab hasil yang salah mungkin adalah faktor reumatoid pesakit, kehadiran penyakit kronik (di mana antibodi dihasilkan), gangguan metabolik, dan pengambilan ubat-ubatan tertentu.

Ujian darah ELISA untuk parasit

Dengan menggunakan kaedah ujian darah ini, kehadiran proses parasit berikut di dalam badan ditentukan:

  • ascariasis;
  • trichinosis - analisis dilakukan beberapa kali, tahap maksimum antibodi ditentukan pada 4-12 minggu selepas jangkitan;
  • cysticercosis;
  • teniasis;
  • fascioliasis - antibodi ditentukan pada peringkat akut penyakit;
  • opisthorchiasis - menjalankan diagnosis pembezaan antara bentuk penyakit kronik dan akut;
  • giardiasis;
  • leishmaniasis viseral dan kulit;
  • amebiasis;
  • toksoplasmosis.

Ujian darah ELISA untuk parasit digunakan untuk mengesan antigen (parasit dan produk metaboliknya) dan antibodi (imunoglobulin). Imunoglobulin dihasilkan di dalam badan sebagai antibodi terhadap antigen. Kekhususan kaedah ini dalam menentukan parasit adalah 90%. Dengan bantuan analisis ini, adalah mungkin untuk menentukan jenis parasit, bilangannya, dan, berkat tahap antibodi, untuk mengesan dinamika perkembangan proses.

ELISA: bagaimana analisis dilakukan? Kos. Penyahkodan hasilnya

Kaedah analisis dengan ketepatan tinggi adalah bahagian penting dalam perubatan moden dan, khususnya, diagnostik. Kaedah diagnostik yang ada pada masa ini memungkinkan untuk mengenal pasti tepat pada masanya bukan hanya fakta kehadiran, tetapi juga jumlah parasit di dalam tubuh pesakit..

Sekarang, sebagai peraturan, pesakit ditawarkan hanya menjalani satu ujian - enzim immunoassay.

Permohonan ujian darah ELISA

Immunoassay adalah jenis analisis yang sangat khusus yang dijalankan di makmal. Analisis ini didasarkan pada tindak balas badan, yang biasanya disebut sebagai "antigen-antibodi".

Kaedah analisis berdasarkan indikator ini memberikan ketepatan 99%. Ini adalah kaedah paling tepat yang diketahui sekarang. Dalam praktiknya, hampir tidak ada kes ketika analisis semacam itu memberikan hasil yang salah..

Kaedah ini membolehkan anda mengenal pasti:

  • sebilangan besar penyakit berjangkit yang disebabkan oleh parasit;
  • kehadiran pelbagai jenis penanda tumor;
  • dalam perubatan pembiakan - kehadiran protein, hormon dan peptida yang diperlukan untuk menilai kesuburan pesakit;

Kebolehpercayaan hasil ujian bergantung kepada beberapa faktor:

  • sejenis parasit tertentu;
  • bilangan parasit di dalam badan;
  • kadar pembiakan mereka.

Bilakah analisis jenis ini digunakan??

Enzim immunoassay digunakan secara meluas dalam diagnosis pelbagai penyakit. Nilai utamanya ialah ia membolehkan anda mengenal pasti penyakit yang tidak simptomatik.

Seperti yang anda ketahui, penyakit seperti itu sering bermasalah untuk dikesan pada peringkat awal dan, oleh itu, mula dirawat tepat pada waktunya..

Penyakit apa yang didiagnosis menggunakan enzim immunoassay:

  • penyakit onkologi;
  • jangkitan kelamin (HIV, klamidia, sifilis, ureaplasmosis, herpes dan penyakit lain);
  • batuk kering, campak, toksoplasmosis, hepatitis, dan sebagainya;
  • hormon tiroid;
  • hormon seks;
  • pelbagai gangguan autoimun;
  • reaksi alergi dan intoleransi terhadap makanan tertentu.

Faktor apa yang berdasarkan ELISA?

Prosedur ini membantu mengenal pasti:

  • jangkitan badan dengan bakteria dan virus;
  • asas protein;
  • pencerobohan helminthik;
  • badan asing.

Sebenarnya, prosedur ELISA terdiri daripada dua bahagian:

  1. tindak balas imun;
  2. tindak balas enzimatik.

Inti dari prinsip "antigen-antibodi" adalah bahawa agen penyebab penyakit atau benda asing, iaitu, antigen, memasuki tubuh secara beransur-ansur bersama dengan sumber jangkitan. Proses ini mencetuskan tindak balas imun yang disebut, yang dirancang untuk melindungi tubuh dari unsur asing..

Manifestasi perlindungan tersebut bergantung pada antigen itu sendiri dan pada gejala penyakit yang disebabkan olehnya. Skema ini disebut "antigen-antibodi".

Untuk kebolehpercayaan diagnostik yang lebih besar, keseluruhan prosedur immunoassay enzim dilakukan hanya di makmal dan pusat perubatan. Pelbagai antigen dan antibodi berinteraksi dengan sampel darah.

Untuk mengenal pasti jenis dan kuantiti parasit dalam tubuh pesakit, imunoglobulin kelas "A" dan "E" digunakan, yang bertindak balas terhadap serangan parasit.

Analisis sedemikian harus menunjukkan:

  • IgM;
  • IgA;
  • IgG;

Apakah tindak balas imun dan bagaimana pengenalan antigen ditentukan?

Tindak balas imun menunjukkan ikatan biologi dalam molekul sel mikroba, yang mana analisisnya dijalankan. Tindak balas imun hanya merupakan salah satu komponen program ELISA yang komprehensif, sementara komponen kedua adalah reaksi enzimatik.

Pengecaman antigen berlaku semasa hubungan sel sel sistem imun (imunosit) dengan sel asing. Ciri-ciri individu antigen berfungsi sebagai alat untuk mengenali "kawan atau musuh" untuk sistem imun.

Apa itu antibodi?

Sebenarnya, antibodi:

  • Ia hanyalah molekul yang terletak di permukaan imunosit..
  • Molekul ini digunakan untuk mengenali sel asing..

Penyebaran maklumat yang diterima mengenai antigen berlaku pada tahap sel. Sambungannya hancur jika sel kebal, jika tidak, tubuh melancarkan reaksi pertahanan semula jadi.

Sains moden mengetahui 5 kelas antibodi, yang disebut imunoglobulin atau struktur protein.

Huruf Latin digunakan untuk menunjukkan antibodi: A, D, E, G dan M.

Dalam hasil analisis, sebutan ini kelihatan seperti ini:

  • IgA;
  • IgD;
  • IgE
  • IgG;
  • IgM.

Prosedur immunoassay enzim

Pertama sekali, perlu menyediakan plat polistirena khas yang mengandungi 96 telaga. Sebelum analisis, dinding setiap sel dirawat dengan antigen yang menyerap.

Serum darah menetes ke sel yang dirawat. Antibodi homogen dan antigen bertindak balas antara satu sama lain untuk membentuk ikatan yang kuat. Mayat yang tidak dilampirkan dibasuh. Kemudian antibodi imunoglobulin ditambahkan ke dalam sumur bersama dengan unsur enzim berlabel khas.

Reagen dilabel untuk memudahkan pengenalan antibodi dalam serum yang dianalisis. Unsur kromogenik yang mempercepat tindak balas dan mewarnai telaga ditambahkan setelah dibilas. Keamatan warna jika dibandingkan dengan enzim yang dikaji menunjukkan peratusan antigen dalam sampel darah.

Juruteknik kemudian menggunakan cecair optik untuk:

  • mengukur kepekatan antibodi di telaga;
  • membandingkan hasil yang diperoleh dengan sampel kawalan, iaitu standard;
  • hitung kepekatan antibodi menggunakan skala khas.

Untuk menganalisis pencerobohan helminthik, digunakan versi khas sistem ujian, dengan set indikator norma dan penyimpangannya sendiri.

Persediaan untuk analisis

Pensampelan serum darah untuk immunoassay enzim dilakukan hanya di makmal. Mereka mengambil darah dari urat, mengeluarkan unsur-unsur dari sana yang dapat mempengaruhi proses analisis dan ketepatan hasilnya. Lakukan analisis pada waktu pagi semasa perut kosong.

Menyahkod keputusan enzim immunoassay

Kualiti dan kuantiti antibodi menunjukkan adanya unsur asing di dalam tubuh pesakit, termasuk patogen. Tanda-tanda yang sama menunjukkan bahawa proses keradangan telah bermula di dalam badan..

Contoh penyahkodan hasil ELISA:

Tahap penyakitIgAIgMIgG
Primer (2 minggu selepas jangkitan)+--
Primer (2.5-3 minggu dari saat jangkitan)++-
Primer (3-4 minggu dari saat jangkitan)+++
Eksaserbasi fasa kronik (2 minggu dari permulaan eksaserbasi)+-+
Kronik+/--+
Masa lalu (jangkitan sembuh)--+
PemulihanTiter menurun 2-4 kali setelah berjaya menjalani rawatan-Titer menurun 4-8 kali selepas 1-1.5 bulan setelah berjaya menjalani rawatan
Hasilnya adalah negatif---

Dengan sendirinya, analisis kuantitatif yang dilakukan dengan kaedah ini belum memungkinkan untuk mendiagnosis penyakit secara tepat, menetapkan rawatan dan menentukan dos ubat..

Kebaikan dan keburukan ELISA

Semua kaedah ujian, bahkan yang paling maju dan sangat tepat, sayangnya, selain daripada kelebihannya, mempunyai kekurangannya..

Kebaikan imunisasi enzim:

  • Pengkhususan kaedah diagnostik;
  • Peningkatan kepekaan kaedah ini;
  • Penerapan teknologi terkini.

Sensitiviti kaedah diagnostik adalah kebarangkalian tinggi untuk mencari kaedah yang diinginkan, walaupun kepekatannya dalam bahan ujian sangat rendah.

Kekhususan teknik bermaksud:

    tahap kebolehpercayaan yang tinggi, iaitu, tidak ada risiko mendapat hasil yang salah. Sekiranya hasilnya positif, maka pesakit dijamin bahawa jenis parasit yang tepat dari mana dia menderita dijumpai;

  • kesan pada hasil "faktor manusia", iaitu kemungkinan kesalahan pembantu makmal, dikurangkan menjadi sifar, yang juga menyumbang kepada peningkatan ketepatan.
  • Kemungkinan kelemahan kaedah analisis ini:

    1. Ini mengandaikan penentuan sifat penyakit, iaitu, mustahil untuk "meneka" secara intuitif diagnosis yang tepat dalam kes ini;
    2. Kos analisis yang tinggi.

    Perbandingan immunoassay duodenal dan enzim langsung

    Prosedur ELISA secara langsung menggunakan kemampuan antibodi untuk mencari antigen dengan membentuk ikatan dengan label. Kaedah analisis ini dianggap industri, masa menunggu hasilnya tidak lebih dari satu jam.

    Label substrat khas muncul selepas penapaian. Tahap antibodi sesuai dengan bahagian antigen dalam biomaterial yang dikaji.

    Terdapat juga kaedah penyelidikan duodenal (sebaliknya - tidak langsung) untuk pencerobohan parasit, yang banyak digunakan, walaupun ketepatan ELISA yang tinggi.

    Imunoassay enzim duodenal (tidak langsung) dilakukan dalam 2 peringkat:

    1. Pertama, antibodi berlabel dibandingkan dengan antigen yang dikehendaki;
    2. Sapukan antibodi berlabel pada antibodi tanpa label yang terdapat pada tahap sebelumnya.

    Oleh itu, kawalan dua kali ganda antigen dan antibodi dicapai, meningkatkan kebolehpercayaan analisis.

    Dengan ELISA tidak langsung di makmal, antigen terpaku pada permukaan telaga, ia membentuk ikatan dengan bahagian antibodi yang tidak berlabel.

    Kelebihan kaedah duodenal:

    • Penguasaan dua kali ganda terhadap biomaterial yang dikaji, yang meningkatkan ketepatan dengan ketara;
    • Peningkatan ketepatan dan kekhususan kaedah analisis itu sendiri.

    Walau bagaimanapun, kaedah ini memerlukan banyak masa dan melibatkan beberapa langkah tambahan. Walau bagaimanapun, ketepatan kajian ini sangat tinggi sehingga membenarkan kelemahan ini. Atas sebab ini, kebanyakan doktor mengesyorkan kaedah analisis duodenum..

    Ke mana hendak pergi, berapa lama menunggu dan berapa banyak yang perlu dibayar?

    Sekiranya anda mempunyai semua alat dan barang keperluan, anda boleh mendapatkan hasilnya dalam 2 hari selepas penghantaran. Sekiranya makmal mempunyai perkhidmatan analisis ekspres, maka sampel dapat diproses hanya dalam 3-5 jam.

    Di mana saya boleh mengambil ELISA:

    • di klinik negeri;
    • di klinik swasta.

    Harga untuk enzim immunoassay secara langsung bergantung pada tahap harga di klinik tertentu, rata-rata, harganya sekurang-kurangnya 4000 rubel.

    Maklumat yang diperoleh dari kajian ini dapat menjadi sumbangan yang berguna untuk sains perubatan, namun, pesakit harus ingat bahawa kerana biaya imunisasi enzim sangat tinggi, lebih bijak untuk mempercayakan prosedur ini ke klinik yang dapat diperiksa dan diuji masa..

    Malangnya, institusi perubatan negeri tidak selalu dilengkapi dengan sains terkini. Peranti yang diperlukan untuk pengambilan sampel biomaterial berkualiti tinggi dan pemprosesannya di klinik daerah mungkin tidak tersedia.

    Oleh itu, bagaimana enzim immunoassay berguna untuk pesakit:

    • membolehkan anda mengesan pencerobohan helminthik pada peringkat awal;
    • akibatnya, ia membolehkan anda memulakan rawatan tepat pada masanya;
    • kestabilan kaedah memungkinkan untuk menjalankan analisis dengan ketepatan yang sama pada kanak-kanak dan orang dewasa.

    Enzim immunoassay menunjukkan bukan hanya faktor kualitatif, tetapi juga faktor kuantitatif, yang bukan hanya menunjukkan fakta adanya helminths dalam tubuh pesakit, tetapi juga memungkinkan untuk menganggarkan jumlah mereka.

    Apakah ujian darah untuk ELISA

    Perkembangan perubatan moden dalam dunia diagnostik tidak pernah berhenti mengagumkan dengan pencapaiannya, dan sekarang doktor tidak perlu membuat andaian mengenai kemungkinan diagnosis, hanya bergantung pada tanda-tanda tidak langsung. Penciptaan dan pengenalan ke dalam dunia penyelidikan makmal pengujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA) membolehkan anda menentukan dengan cepat dan tepat bukan sahaja kehadiran patogen, tetapi juga banyak ciri lain penyakit ini.

    Sejarah penciptaan dan pengembangan IFA

    Kaedah ujian darah ini mula digunakan dalam perubatan praktikal pada pertengahan abad yang lalu - di suatu tempat pada tahun 60-an. Tujuan awalnya adalah penyelidikan ilmiah dalam bidang histologi, yang hanya terbatas pada pencarian dan kajian struktur antigenik selular spesies biologi. Ujian darah dengan kaedah ELISA didasarkan pada interaksi antigen terkait (AG) dan antibodi spesifik (AT), dengan pembentukan kompleks "antigen-antibodi", ditentukan oleh enzim.

    Fenomena ini mendorong para saintis untuk memutuskan bahawa kaedah itu dapat digunakan untuk mengenali sebatian protein dari pelbagai kelas yang terbentuk dalam serum darah ketika patogen memasuki tubuh. Oleh kerana penglibatan mereka secara langsung dalam fungsi sistem kekebalan tubuh, sebatian ini disebut imunoglobulin (Ig, Ig), dan penemuan ini merupakan penembusan terbesar dalam diagnostik makmal..

    Pada masa yang sama, kaedah yang sangat sensitif ini mula digunakan secara aktif hanya pada tahun 80-an, dan hanya boleh didapati di institusi perubatan yang sangat khusus. Yang pertama dapat menggunakan penganalisis immunoassay enzim di stesen dan pusat pemindahan darah, institusi perubatan venereal dan berjangkit. Ini disebabkan oleh penyebaran "wabak abad ke-20" yang cepat - AIDS, dan tindakan diagnostik dan terapi segera diperlukan..

    Kemungkinan teknik

    Bidang aplikasi ujian darah untuk ELISA cukup luas - pada masa ini mustahil untuk membayangkan betapa rumitnya pencarian penyebab banyak penyakit. Penyelidikan seperti ini kini digunakan di hampir semua bidang perubatan, bahkan dalam bidang onkologi. Walaupun sulit untuk dimengerti yang tidak berpengetahuan, dalam beberapa kasus, setelah melakukannya, adalah mungkin untuk menyelamatkan nyawa pesakit, setelah menemukan tumor pada tahap awal..

    Di pusat diagnostik moden, pemeriksaan makmal tidak hanya ditunjukkan oleh penanda tumor - mereka juga dilengkapi dengan panel panel yang mengagumkan untuk menjalankan diagnosis ini. Dengan pertolongan mereka, banyak keadaan patologi dapat ditentukan, seperti kelainan hormon dan proses berjangkit dari pelbagai asal..

    Di samping itu, melakukan dan menyahkod ujian darah ELISA akan memungkinkan untuk mengesan kesan ubat-ubatan pada tubuh orang yang sakit dan juga haiwan. Yang terakhir digunakan secara meluas di klinik veterinar, membantu menjaga kesihatan haiwan peliharaan atau pencari nafkah kita, menyediakan bekalan daging, produk tenusu dan telur yang tidak tergantikan dalam diet..

    Oleh itu, akibat mengambil hanya beberapa mililiter darah vena dan diagnosisnya menggunakan kaedah ELISA, doktor, setelah menerangkan bahan penyelidikan, dapat menentukan:

    • keadaan hormon, termasuk bahan aktif biologi gonad dan kelenjar tiroid, serta kelenjar adrenal;
    • kehadiran jangkitan bakteria dan virus (hepatitis B dan C, sifilis, herpes, klamidia, tuberkulosis, myco- dan ureaplasmosis, HIV, TORCH) dan penyakit lain seperti ini;
    • tanda-tanda aktiviti penting patogen proses patologi, yang berakhir dalam pemulihan dan melewati tahap pembentukan antibodi (tindak balas imun).

    Kompleks semacam itu jauh lebih mudah dikenali dan dihilangkan oleh sel-sel imun. Kesan sisa dalam bentuk antibodi dalam banyak kes terkandung dalam darah seumur hidup, yang secara praktikal mengurangkan risiko jangkitan semula menjadi sifar.

    Varieti imunoglobulin

    Terdapat beberapa jenis antibodi, dan masing-masing terlibat dalam proses tindak balas imun pada tahap tertentu. Sebagai contoh, imunoglobulin kelas M (IgM) adalah yang pertama terbentuk sebagai tindak balas kepada kemasukan hipertensi ke dalam badan. Kadar tertinggi mereka diperhatikan pada hari-hari pertama penyakit ini..

    Kemudian sistem imun melancarkan kelas G Ig (IgG) ke dalam plasma, yang bertanggungjawab untuk pemusnahan antigen sepenuhnya dan pemulihan pesakit. Kemudian, mereka terus berada di dalam darah, dengan itu menyediakan kekebalan untuk serangan berulang patogen yang sama. Inilah cara kerja vaksinasi. Dengan pengenalan antigen mikroorganisma patologi yang lemah, banyak imunoglobulin muncul dan tetap beredar di plasma.

    Dan, seterusnya, jika berlaku kontak patogen, mereka dapat mengatasi jangkitan dengan cepat, menyelamatkan tubuh dari ancaman kesihatan. IgA tertumpu dalam jumlah besar pada selaput lendir, menyekat kemasukan virus dan bakteria patogen ke dalam badan. IgE bertanggungjawab untuk membunuh jangkitan parasit, dan terdapat banyak imunoglobulin lain yang terlibat dalam tindak balas imun.

    Objek utama yang menarik untuk diagnostik makmal adalah kelas Ig M, G dan A. Dengan tahap kepekatannya, anda dapat menentukan tahap penyakit dan mengetahui penyakit berjangkit apa yang seseorang alami dalam hidupnya. Contohnya, anda boleh memeriksa sama ada terdapat sejarah cacar air atau rubella. Doktor, untuk mengetahui sama ada jenis AT atau AH tertentu terdapat di dalam badan pesakit atau kepekatan hormon apa pun, tidak perlu menetapkan beberapa pemeriksaan makmal - cukup untuk menulis rujukan untuk ELISA.

    Intipati teknik

    Uji imunosorben yang berkaitan dengan enzim untuk parasit dan mikroorganisma lain - perosak kesihatan tubuh memungkinkan bukan sahaja untuk membuktikan adanya patogen, tetapi juga memberitahu tentang jumlahnya dalam plasma darah pesakit. Oleh itu, kajian sedemikian memungkinkan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif mikroorganisma patogen yang terdapat dalam serum..

    Tahap kepekatan patogen secara signifikan mempengaruhi perkembangan jangkitan dan kadar pemulihan, oleh itu penilaian kualitatif dianggap tidak kurang penting daripada penilaian kuantitatif. Dia diberikan jauh dari peranan terakhir dalam rawatan kanak-kanak dan orang dewasa. Tetapi bagaimana ELISA mampu mengenali pelbagai mikroorganisma yang parasit tubuh manusia dan haiwan, menyebabkan bahaya dan mengurangkan kualiti hidup??

    Metodologi kajian didasarkan pada beberapa pilihan (langsung dan tidak langsung - kompetitif dan tidak kompetitif) untuk melaksanakan tugas yang diberikan, masing-masing dirancang untuk tujuan tertentu. Pendekatan ini memungkinkan untuk mencari sasaran, dan dalam waktu sesingkat mungkin untuk mengenal pasti penyebab patologi tertentu. Untuk mengesan Ig dari kategori kelas yang berlainan, plat 96 sumur (panel polistirena) digunakan, dan protein rekombinan yang diserap terletak di telaga. Mereka memainkan peranan antigen, dan pada peringkat awal berada dalam fasa pepejal.

    Ketika memasuki sumur dengan plasma darah, antigen atau antibodi mengenal pasti objek yang berkaitan dengan orientasinya, dan membentuk kompleks (AG - AT). Pembentukan ini diperbaiki oleh sebatian enzim (konjugat), yang kemudian akan menampakkan dirinya sebagai pewarnaan sumur yang berubah. ELISA dihasilkan pada sistem ujian khusus yang dihasilkan di makmal khusus dan dilengkapi dengan set reagen yang lengkap.

    Analisis ini dapat dilakukan pada mesin basuh - mesin cuci dan pembacaan spektrofotometer, tetapi ia memerlukan tenaga kerja manual. Sudah tentu, pembantu makmal beberapa kali lebih mudah dan pantas untuk melakukan semua manipulasi pada peranti automatik sepenuhnya. Semasa menggunakannya, kakitangan makmal dibebaskan dari sejumlah besar aktiviti monoton - mencuci, menanam dan lain-lain rutin, tetapi tidak semua institusi perubatan mampu membeli peralatan yang mahal

    Tafsiran bahan penyelidikan secara eksklusif adalah kecekapan pakar diagnosis makmal - hanya dia yang dapat diberitahu hasilnya mengenai spesifik dan kehalusan perjalanan penyakit ini. Dalam kes ini, doktor mesti mengambil kira kemungkinan mendapat jawapan positif palsu atau negatif positif..

    Penyahkodan bahan

    Hasil imunoassay enzim berkualiti tinggi mestilah kesimpulan yang jelas - mikroorganisma yang diinginkan dijumpai atau tidak dalam sampel darah ini. Analisis kuantitatif akan menunjukkan tahap kepekatan dan dapat dinyatakan dalam dua cara - berdasarkan nilai dalam angka atau dengan bilangan tanda "+".

    Petunjuk yang dianalisis

    Semasa penyelidikan, kajian yang teliti terhadap imunoglobulin utama yang terlibat dalam tindak balas imun dilakukan, seperti:

    • IgM - pengesanan kelas ini bermaksud perkembangan bentuk akut penyakit berjangkit. Hasil negatif untuk mencari IgM boleh menjadi bukti ketiadaan patogen yang diinginkan, dan peralihan penyakit ke arah kronik.
    • IgA - penentuan kelas ini dalam ketiadaan IgM dalam kebanyakan kes, isyarat bentuk kronik atau pendam perkembangan penyakit berjangkit.
    • IgM dan IgA (kehadiran serentak) - hasil positif untuk kedua-dua jenis menunjukkan puncak bentuk patologi akut.
    • IgG - kehadirannya menunjukkan perubahan penyakit menjadi bentuk kronik atau dalam pemulihan dan pembentukan imuniti kepada agen yang ditentukan.

    Kemunculan dan pengumpulan kelas IS tertentu berlaku pada tahap masa yang berbeza. Jadi, sebagai contoh, IgM muncul pertama, kira-kira 5 hari selepas patogen menyerang. IG kekal dalam darah selama kira-kira 5-6 minggu dan kemudian secara beransur-ansur hilang. Pada masa ini, mereka tersedia untuk ditentukan oleh ELISA. Kira-kira 3-4 minggu selepas bermulanya penyakit, IgG muncul, yang kemudiannya dapat bertahan selama beberapa bulan. Tetapi dalam analisis itu tidak selalu dijumpai.

    IgA terbentuk dalam darah dalam jangka masa 2-4 minggu, sementara 20% daripadanya terkandung dalam serum, dan 80% dalam rembesan membran mukus. Sebagai peraturan, imunoglobulin ini hilang dalam 2-9 minggu, yang menunjukkan pemusnahan patogen dan pemulihan pesakit. Sekiranya ELISA masih menunjukkan kehadiran IgA, maka ini menandakan peralihan proses ke bentuk kronik..

    Pilihan analisis

    Bergantung pada data yang diperoleh, jawapan ELISA dapat dikeluarkan dalam bentuk berupa tabel dengan daftar lengkap semua AT dan AG dan petunjuk reaksi positif atau negatif. Dalam situasi tertentu, nilai kuantitatif akan ditunjukkan - hasil positif, positif, lemah positif atau negatif. Pilihan kedua menunjukkan jumlah antibodi yang terdapat dalam sampel darah yang dikaji.

    Sebagai tambahan kepada nilai di atas, parameter kuantitatif lain disiasat dalam proses ELISA - indeks ketersediaan AT, dikira sebagai peratusan. Ini menunjukkan berapa lama penyakit ini berlanjutan - iaitu, semakin tinggi penunjuknya, semakin banyak masa patologi berkembang.

    Kaedah ELISA alternatif

    Uji imunisasi enzim adalah diagnosis yang cukup terkenal dan biasa. Mungkin ada yang tidak pernah mendengarnya, tetapi ada versi lain dari kajian ini, bahkan kurang diketahui oleh sebilangan besar orang, di mana sampel tidak diambil darah. Teknik ini disebut analisis tinja untuk darah ghaib, dan dalam banyak kes, ini memungkinkan anda untuk mengelakkan prosedur tambahan yang melelahkan, yang juga disertai dengan sensasi yang tidak menyenangkan..

    Ujian ELISA untuk darah ghaib (molekul hemoglobin) memungkinkan untuk mengesan pendarahan sistem pencernaan, walaupun tidak signifikan, tanda-tanda di mana najis pesakit, seperti yang mereka katakan, tidak dapat dijumpai dengan mata kasar. Ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim pada tinja manusia dalam masa yang singkat dapat menunjukkan ulser peptik, poliposis, divertikulosis, tumor yang tidak disertai dengan gejala tertentu pada peringkat awal.

    Setakat ini, beribu-ribu jenis sistem ujian immunoassay enzim telah dibuat, yang memberi peluang untuk mencari AT dan AG senarai besar patologi. Oleh itu, analisis ini digunakan di hampir semua cabang perubatan, untuk kategori umur apa pun. Keburukan yang mutlak membolehkan anda menggunakannya sepanjang kehamilan dan untuk diagnosis pesakit yang lemah.