Reaksi fiksasi pelengkap (CBC)

Reaksi fiksasi pelengkap (PCR) dimasukkan dalam dua fasa: pada fasa pertama, antigen digabungkan dengan serum ujian, di mana antibodi dianggap dan pelengkap ditambahkan, diinkubasi dalam termostat selama 30 minit.

Fasa kedua: tambahkan sistem hemolitik (eritrosit domba + serum hemolitik). Setelah inkubasi dalam termostat selama 30 minit, ambil kira hasilnya.

Dengan CSC positif, antibodi serum, bergabung dengan antigen, membentuk kompleks imun yang melekat pada dirinya sendiri, dan hemolisis tidak akan berlaku. Sekiranya tindak balas negatif (tidak ada antibodi dalam serum ujian), pelengkap akan bebas dan hemolisis akan berlaku.

RSC digunakan untuk diagnosis serologi sifilis, gonorea, tifus dan penyakit lain.

Reaksi imuniti menggunakan antigen berlabel dan antibodi berdasarkan fakta bahawa salah satu bahan yang terlibat dalam reaksi (antigen atau antibodi) digabungkan dengan label yang dapat dikesan dengan mudah. Fluorokrom (RIF), enzim (ELISA), radioisotop (RIA), sebatian padat elektron (IEM) digunakan sebagai label..

Uji imunosorben berkait enzim (ELISA), seperti reaksi imun yang lain, digunakan: 1) untuk menentukan antigen yang tidak diketahui menggunakan antibodi yang diketahui atau 2) untuk mengesan antibodi dalam serum menggunakan antigen yang diketahui. Keanehan reaksi adalah bahawa bahan reaksi yang diketahui digabungkan dengan enzim (misalnya, peroksidase). Kehadiran enzim ditentukan menggunakan substrat, yang diwarnai oleh tindakan enzim. ELISA fasa pepejal yang paling banyak digunakan.

1) Pengesanan antigen. Tahap pertama adalah penjerapan antibodi spesifik pada fasa pepejal, yang merupakan permukaan polistirena atau polivinil klorida dari telaga panel plastik. Tahap kedua adalah penambahan bahan ujian di mana kehadiran antigen dianggap. Antigen mengikat antibodi. Selepas ini, telaga dibasuh. Tahap ketiga adalah penambahan serum khusus yang mengandungi antibodi terhadap antigen ini, yang diberi label dengan enzim. Antibodi berlabel mengikat antigen dan kelebihan antibodi dikeluarkan dengan mencuci. Oleh itu, jika terdapat antigen dalam bahan uji, antibodi-antigen-antibodi yang berlabel kompleks enzim terbentuk di permukaan fasa pepejal. Substrat ditambahkan untuk mengesan enzim. Untuk peroksidase, substrat adalah orthophenylenediamine dicampur dengan H2TENTANG2 dalam larutan penyangga. Di bawah tindakan enzim, produk terbentuk yang mempunyai warna coklat.

2) Pengesanan antibodi. Tahap pertama adalah penjerapan antigen spesifik di dinding telaga. Biasanya, dalam sistem ujian komersial, antigen sudah terserap di permukaan telaga. Tahap kedua adalah penambahan serum ujian. Dengan adanya antibodi, kompleks antigen-antibodi terbentuk. Tahap ketiga - selepas mencuci, antibodi antiglobulin (antibodi terhadap globulin manusia) yang dilabelkan dengan enzim ditambahkan ke dalam sumur. Hasil tindak balas dinilai seperti di atas..

Sampel yang diketahui positif dan diketahui negatif, yang terdapat dalam sistem komersial, digunakan sebagai kawalan..

ELISA digunakan untuk mendiagnosis banyak penyakit berjangkit, khususnya, jangkitan HIV, hepatitis virus.

Immunoblotting adalah sejenis ELISA (gabungan elektroforesis dan ELISA). Biopolimer, misalnya, antigen virus imunodefisiensi manusia, dipisahkan oleh elektroforesis gel. Kemudian molekul yang dipisahkan dipindahkan ke permukaan nitroselulosa dalam urutan yang sama di mana mereka berada di dalam gel. Proses pemindahan disebut blotting, dan cetakan yang dihasilkan disebut blot (blot). Kesan ini dipengaruhi oleh serum ujian. Kemudian tambahkan serum terhadap globulin manusia, dilabel dengan peroksidase, kemudian substrat, yang di bawah tindakan enzim menjadi coklat. Jalur coklat terbentuk di mana antibodi telah terikat dengan antigen. Kaedah ini membolehkan anda mengesan antibodi terhadap antigen virus masing-masing.

Radioimmunoassay (RIA). Kaedah ini membolehkan anda menentukan jumlah antigen dalam sampel ujian. Pertama, bahan yang disyaki mengandungi antigen dilekatkan pada serum kekebalan tubuh, kemudian antigen yang diketahui dilabel dengan radioisotop, misalnya I 125. Akibatnya, antigen berlabel yang dapat dikesan (tidak dilabel) dan diketahui akan mengikat sejumlah antibodi yang terhad. Oleh kerana antigen berlabel ditambahkan dalam dosis tertentu, adalah mungkin untuk menentukan seberapa banyak antigen yang terikat pada antibodi, dan bahagian mana yang bebas kerana persaingan dengan antigen yang tidak berlabel dan dikeluarkan. Jumlah antigen berlabel yang terikat pada antibodi ditentukan menggunakan pembilang. Ia berkadar songsang dengan jumlah antigen yang dikesan.

Mikroskopi imunoelektron (IEM). Antiserum tertentu yang berlabel zat padat elektron melekat pada antigen, misalnya pada virus influenza. Protein yang mengandungi logam (ferritin, hemocyanin) atau emas koloid digunakan sebagai label. Dengan mikroskop dalam mikroskop elektron, foto diambil, yang menunjukkan virion influenza dengan titik gelap yang terpasang - molekul antibodi berlabel.

Mengawal soalan

Memperolehi kekebalan, perbezaannya dari keturunan (spesifik, bawaan). Jenis imuniti yang diperoleh.

Tugas. Di dalam keluarga, anak Valery, tiga tahun, jatuh sakit dengan difteria. Anggota keluarga yang lain tidak jatuh sakit, dan ibu itu menderita difteria pada masa kecil, dan ayahnya diberi vaksin dengan toksoid difteri. Kakak perempuan Natasha, lima tahun, tidak diberi vaksin dengan toksoid difteri pada satu masa kerana kontraindikasi perubatan, jadi dia harus menjalani profilaksis kecemasan dengan bantuan serum antitoksik anti-difteria. Adik lelaki, Vitaly, berusia tiga bulan, tidak jatuh sakit, walaupun dia tidak diberi vaksin dengan apa-apa. Terdapat kucing dan anjing di dalam rumah, mereka tidak sakit. Namakan untuk setiap ahli keluarga dan bagi haiwan jenis kekebalan kerana mereka tidak jatuh sakit.

Apa itu antigen? Bahan apa yang boleh menjadi antigen? Antigen dan hapten lengkap, bagaimana ia berbeza antara satu sama lain? Struktur antigen. Apakah nama bahagian molekul antigen yang menentukan kekhususannya? Namakan antigen yang diketahui oleh anda. Apa itu autoantigen? Struktur antigen sel mikrob. Antigen flagellate dan somatik; penyetempatan, sebutan huruf, sifat kimia, hubungan dengan suhu, kaedah pengeluaran, aplikasi praktikal. Toksid, sifat, aplikasi, pengeluarannya. Tisu apa yang membentuk sistem imun badan? Nyatakan organ pusat dan periferal sistem imun manusia. Huraikan pembentukan tindak balas imun humoral dan selular. Nyatakan sel yang menangkap dan mencerna antigen; sel yang berinteraksi dalam pembentukan imuniti humoral, imuniti selular; sel yang diubah dan diubah menjadi sel plasma yang menghasilkan antibodi; sel yang merangsang proses ini; sel yang menekan tindak balas imun; sel yang membunuh sel tumor dan sel yang dijangkiti virus. Apa itu antibodi? Bagaimana anda mendapat serum imun? Bagaimana anda mendapatkan serum yang meneutralkan toksin tetanus? Antigen apa antitoksin, aglutinin, hemolysin yang terbentuk? Apa antibodi yang terbentuk apabila toksoid difteria dimasukkan ke dalam badan? bakteria difteria? Sifat kimia dan struktur antibodi. Apakah laman web imunoglobulin yang aktif? Senaraikan kelas imunoglobulin, sifatnya. Nyatakan kelas imunoglobulin yang boleh menyeberangi plasenta. Apakah kelas imunoglobulin sekretori? Dinamika pengumpulan antibodi. Bagaimana tindak balas imun sekunder berbeza dengan tindak balas primer? Bagaimana pengetahuan mengenai dinamika tindak balas imun digunakan dalam perubatan praktikal? Apa reaksi imuniti, apakah mekanisme mereka, fasa reaksi. Dalam 2 arah apa reaksi imun digunakan? Senaraikan reaksi imuniti.

Tugas. Ganti perkataan "toxoid" atau "antitoxin" yang hilang: _________ adalah antigen, _________ adalah antibodi, __________ mewujudkan imuniti aktif ketika diperkenalkan ke dalam badan, __________ mewujudkan imuniti pasif ketika diperkenalkan ke dalam badan, __________ diperoleh dengan mengimunisasi haiwan, ___________ diperoleh dari racun apabila terdedah formalin dan panas, ___________ meneutralkan toksin, __________ menyebabkan pembentukan antibodi dalam badan.

Reaksi agregasi: apa itu aglutinasi, apa itu antigen, apa itu antibodi; kaedah penetapan, kawalan apa yang ditetapkan dan mengapa; seperti apa kawalan. Sera agregat, apa yang terkandung di dalamnya, bagaimana ia diperoleh, untuk apa ia digunakan; apa itu titer penggabungan serum? Reaksi hemaglutinasi tidak langsung (pasif): apa yang berfungsi sebagai antigen dalam tindak balas ini, bagaimana ia diperoleh, mekanisme tindak balas. Apa itu diagnostik eritrosit? Apa itu diagnostik eritrosit antibodi? Reaksi pemendakan: apakah pemendakan, antigen apa; bagaimana mendapatkan serum pemendapan? Apa itu titer serum pemendapan? Kaedah penetapan, aplikasi praktikal.

Reaksi fiksasi pelengkap (CBC): Prinsip CBC; apa yang terbentuk semasa serum imun berinteraksi dengan antigen tertentu; apa yang berlaku pada pelengkap jika terdapat semasa interaksi ini? Apakah nasib pelengkap jika tidak ada pertalian khusus antara antigen dan antibodi? Sekiranya hasil akhir CSC adalah hemolisis, apakah maksudnya - positif atau negatif? Metodologi untuk menubuhkan RSK. Mengapa serum ujian tidak diaktifkan? Serum hemolitik: apa kandungannya, bagaimana ia diperoleh, apakah titernya dan bagaimana ia ditentukan? Pelengkap: sifat kimia, hubungan dengan suhu tinggi, di mana kandungannya? Bagaimana pelengkap dapat dimusnahkan? Yang praktikal digunakan sebagai pelengkap?

Tugas. Noda darah dijumpai pada pakaian lelaki yang dituduh melakukan pembunuhan itu. Reaksi apa yang boleh digunakan untuk menentukan sama ada darah manusia; apa yang akan menjadi antigen dalam tindak balas ini, dan apa yang akan menjadi antibodi; ejen diagnostik apa yang mesti ada di makmal untuk reaksi ini, bagaimana ia disediakan?

Tugas. Cara menggunakan reaksi pemendakan untuk menentukan sama ada sampel daging lembu atau daging kuda yang dihantar untuk analisis adalah; ubat diagnostik apa yang diperlukan?

Tindak balas pemendakan gel Agar, kaedah penetapan, aplikasi praktikal.

Kajian serologi: apakah itu, kaedah diagnostik, proses penyampaian, tafsiran hasilnya

Setiap daripada kita selama hidupnya sekurang-kurangnya sekali menghadapi penyakit berjangkit. Kesemuanya disebabkan oleh sebilangan besar agen patogen: bakteria, virus, protozoa dan kulat. Mikrobiologi mempunyai berjuta-juta mikroorganisma yang boleh menyebabkan perkembangan jangkitan pada manusia.

Sebahagian daripada mereka adalah patogen oportunis, yang lain adalah patogen wajib. Dalam bidang perubatan, terdapat sebilangan besar kaedah makmal untuk mengenal pasti patogen. Setiap daripadanya mempunyai kekurangan dan kelebihan tersendiri. Kepekaan dan ketepatan kaedah sangat penting..

Kaedah yang paling biasa digunakan adalah kajian molekul genetik dan serologi. Semasa menerima rujukan untuk kajian molekul dan serologi, pesakit memikirkan apa itu dan percaya bahawa ini adalah pemeriksaan yang sangat sukar. Sebenarnya, proses lulus analisis tidak melebihi 5 minit, dan kandungan maklumat berkisar antara 95-100%.

  1. Apa itu analisis serologi
  2. Kelebihan dan kekurangan
  3. Dalam kes apa yang ditetapkan
  4. Kaedah diagnostik
  5. RIF reaksi imunofluoresen
  6. Reaksi hemaglutinasi tidak langsung RNGA
  7. Imunisasi semula enzim ELISA
  8. Cara persediaan untuk penghantaran
  9. Proses analisis
  10. Penyahkodan hasilnya
  11. Apa yang perlu dilakukan sekiranya penyakit kelamin dikesan

Apa itu analisis serologi

Ujian serologi adalah alat penting untuk mengenal pasti penyebab penyakit berjangkit. Serodiagnostik adalah ujian darah tertentu yang berdasarkan interaksi antigen dan antibodi dalam serum.

Antibodi adalah molekul protein yang terbentuk di dalam tubuh manusia beberapa hari selepas terdedah kepada patogen. Mereka khusus untuk setiap jangkitan dan dikembangkan untuk memusnahkan patogen. Pengiktirafan pecahan protein ini memungkinkan untuk mengenal pasti mikroorganisma yang cepat terbentuk. Antigen, sebaliknya, adalah protein asing yang terdapat dalam bakteria. Antibodi yang disintesis menemui antigen dalam darah dan mengikatnya dengan kuat, mencegahnya daripada memberi kesan buruk kepada tubuh.

Reaksi mengikat kedua-dua protein ini untuk membentuk satu kompleks mendasari penggunaan semua reaksi serologi. Untuk mencari antibodi, larutan standard khas dengan antigen patogen (diagnostik) digunakan, yang ditambahkan ke dalam darah yang dianalisis. Serodiagnostik menentukan semua penanda protein jangkitan, dan penyahkodan hasil selanjutnya juga memberikan maklumat mengenai jangka masa penyakit ini. Ciri ini hanya bersifat untuk analisis serologi, yang menjadikannya kaedah pilihan dalam banyak situasi klinikal..

Kelebihan dan kekurangan

Kaedah serologi diagnostik makmal mempunyai sebilangan besar kelebihan, yang secara mendalam memperkenalkannya ke dalam penggunaan praktikal di semua cabang perubatan: ginekologi, urologi, penyakit berjangkit dan venereologi.

Serodiagnosis adalah ujian yang tersedia untuk umum yang memberikan hasil yang cepat dan tepat. Ia tidak memerlukan persiapan yang panjang untuk pengumpulan bahan dan mudah diterima oleh semua pesakit. Untuk mengambil darah vena dari pesakit, perlu mengikuti diet hanya 48 jam. Ujian serologi juga mempunyai kekhususan tinggi (100%), kepekaan (95%) dan ketepatan (90-95%).

Tetapi analisis darah vena ini memerlukan banyak diagnostik yang mahal, yang juga mempengaruhi kosnya. Beberapa patogen lemah imunogenik, iaitu tubuh menghasilkan sedikit antibodi kepada mereka, jadi serodiagnostik tidak mungkin. Di samping itu, kaedah ini lebih jarang digunakan untuk patologi berjangkit virus, kerana kecekapannya lebih rendah daripada analisis PCR..

Dalam kes apa yang ditetapkan

Ujian darah makmal serologi ditetapkan untuk diagnosis penyakit berjangkit: jangkitan bakteria, virus, protozoa, parasit dan campuran. Pengesanan antibodi paling banyak digunakan dalam amalan obstetrik-ginekologi dan urologi. Dalam urologi, kajian makmal ini digunakan untuk uretritis etiologi yang tidak jelas, balanitis dan balanoposthitis. Dalam ginekologi, mereka dihantar untuk diperiksa untuk proses keradangan sistem pembiakan (vulvovaginitis, kolpitis, serviks dan endometritis).

Dalam bidang obstetrik, setiap wanita hamil diberi ujian darah vena untuk mengecualikan penyakit berbahaya bagi janin. Jangkitan ini disebut "TORCH-complex" dan ditentukan menggunakan ujian serologi. Jangkitan TORCH menyebabkan malformasi pada janin yang sedang berkembang, yang sering kali tidak sesuai dengan kehidupan. Itulah sebabnya diagnosis awal dan tepat mengenai jangkitan ini adalah matlamat utama pakar obstetrik-ginekologi. Serologi dijalankan walaupun terdapat kecurigaan ketidaksuburan lelaki atau wanita kerana patologi berjangkit.

Sekiranya doktor mengesyaki pesakit mempunyai jangkitan kelamin, maka pemeriksaan menyeluruh diperlukan, termasuk serodiagnostik. Sekiranya salah satu pasangan didapati mempunyai penyakit dari kumpulan STI, maka pasangan kedua perlu diuji, walaupun dia tidak mempunyai gejala klinikal.

Kaedah diagnostik

Reaksi serologi merangkumi beberapa jenis. Kesemuanya didasarkan pada pencarian antibodi (imunoglobulin) dan antigen, tetapi mereka dilakukan dengan cara yang berbeza dan mempunyai kriteria diagnostik yang berbeza untuk membuat diagnosis. Kaedah serologi penyelidikan makmal, bergantung pada metodologi, dibahagikan kepada sederhana dan kompleks. Pengelasannya berdasarkan berapa banyak protein yang perlu dijumpai: tindak balas sederhana hanya ditentukan oleh antibodi atau antigen, dan yang kompleks - kompleks "antigen + imunoglobulin". Kaedah penyelidikan yang kompleks lebih disukai, kerana kepekaan analisis jauh lebih tinggi.

Selalunya di makmal, diagnostik serologi diwakili oleh seroreaksi imunokimia berikut:

  • tindak balas imunofluoresensi (RIF);
  • immunoassay enzim (ELISA);
  • reaksi hemaglutinasi tidak langsung (RNGA);
  • tindak balas fiksasi pelengkap (PCR).

Jenis penyelidikan ini merujuk kepada seroreaction yang kompleks dan mempunyai kelebihan yang signifikan berbanding yang lain. Ia dilakukan dengan sangat cepat, mempunyai ketepatan yang tinggi dalam mendiagnosis penyakit dan tidak memerlukan persiapan yang panjang: pesakit hanya perlu lulus ujian darah vena..

RIF reaksi imunofluoresen

Reaksi imunofluoresensi (RIF), atau analisis Koons, adalah kaedah untuk mengesan antigen agen patogenik dengan cepat dalam biomaterial pesakit. Untuk RIF, pewarna khas digunakan - fluorokrom, yang boleh bersinar di bawah mikroskop mikrobiologi bercahaya. Fluorokrom ditambahkan ke serum diagnostik dengan mematuhi kepekatan yang ketat, jika tidak, reaksi mungkin menunjukkan hasil yang salah. Tindak balas imunofluoresen terdiri daripada dua jenis: langsung dan tidak langsung.

Reaksi Koons langsung hanya mengesan antigen patogen. Untuk menentukannya, serum diagnostik ditambahkan ke biomaterial, yang terdiri daripada antibodi dan fluorokrom. Antigen di dinding sel patogen mengikat antibodi bernoda. Seorang doktor reaksi makmal memeriksa slaid kaca di bawah mikroskop dan melihat cahaya hijau terang. Contoh khas reaksi seperti itu adalah pengenalan klamidia yang berbeza dengan warna biru Evans.

RIF tidak langsung (RNIF) menentukan kompleks antigen-antibodi. Untuk melakukan ini, doktor secara berurutan menambahkan imunoglobulin yang tidak berlabel ke sampel sehingga mereka mengikat antigen. Kemudian serum baru ditambahkan ke kompleks imun yang terbentuk, mengandungi antibodi yang sudah dilabelkan dengan pewarna ke kompleks yang baru terbentuk. Reaksi langsung yang paling biasa digunakan untuk mendiagnosis penyakit virus..

Satu-satunya kelemahan reaksi ini adalah tahap subjektiviti tertentu apabila mengambil kira hasilnya: intensiti cahaya yang sama kadang-kadang dianggap oleh doktor secara berbeza, yang akhirnya membawa kepada data pemeriksaan makmal yang salah..

Reaksi hemaglutinasi tidak langsung RNGA

RNGA adalah analisis yang bertujuan untuk mengesan imunoglobulin atau antigen dalam pelbagai cecair biologi. Reaksi hemaglutinasi tidak langsung adalah salah satu kaedah yang paling tepat untuk menentukan titer imunoglobulin, yang memungkinkan untuk menilai tahap proses menular. Peningkatan titer imunoglobulin sebanyak 4 kali dalam dua ujian darah yang dilakukan dengan selang beberapa minggu menunjukkan proses berjangkit akut etiologi bakteria atau virus. RNGA membolehkan doktor yang hadir memberikan terapi ubat yang betul, dengan mengambil kira tahap penyakit ini. Kajian ini digunakan secara meluas untuk mengesan IMS, jangkitan meningokokus, toksin botulinum (toksin botulinum) dan kebanyakan jangkitan virus.

Untuk kajian ini, sel darah merah digunakan - eritrosit, di permukaan yang mana antigen atau antibodi berada. Serum dipanggil antigenik atau antibodi eritrosit diagnostik. Diagnosticum ditambahkan ke dalam darah ujian, kemudian reaksi dipantau. Apabila eritrosit ini melekat pada antigen atau imunoglobulin darah, kompleks terbentuk, dan sel darah merah mulai memendap. Apabila diuji negatif, sel darah merah berkumpul dalam bentuk titik kecil dalam bentuk butang. Sekiranya, di bahagian bawah tabung uji atau tablet, endapan dengan tepi kerang dalam bentuk payung telah terbentuk, maka reaksi tersebut dianggap positif.

Kesukaran dalam menjalankan ujian serologi ini terletak pada perlunya penyediaan diagnostik eritrosit yang tepat dan kepatuhan ketat terhadap kepekatan komponen yang digunakan.

Imunisasi semula enzim ELISA

Ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim dianggap sebagai seroreaksi yang paling tepat, spesifik dan sensitif. Perakaunan hasil ELISA adalah automatik, dan faktor manusia dan penilaian data subjektif tidak termasuk. Ketepatan hasilnya mencapai 98%, dan setelah pemeriksaan berulang - 100%. ELISA digunakan untuk mendiagnosis jangkitan menular seksual, HIV, hepatitis virus A, B, C, D, E, jangkitan TORCH dan banyak penyakit lain.

Terdapat lebih daripada sepuluh pengubahsuaian analisis ini (langsung, tidak langsung, tidak kompetitif, fasa pepejal, dan lain-lain), tetapi semuanya mempunyai ciri khas, ciri diagnostik, tetapi prinsip tingkah laku yang serupa. Fasa reaksi serologi imunoassay merangkumi penciptaan kompleks antigen-antibodi, di mana enzim ditambahkan yang memainkan peranan sebagai label. Kemudian bahan ujian diletakkan di atas piring khas, diletakkan di dalam sistem automatik, dan pencarian kompleks yang berlabel radionuklid dimulakan. Penganalisis mengesan tanda bercahaya, mengukur ketumpatan optik dan tahap pencahayaan sel imun, dan kemudian memberikan hasil analisis.

Cara persediaan untuk penghantaran

Analisis tidak memerlukan persiapan khas, semua peraturan sesuai dengan pendermaan darah vena yang biasa.

Pesakit dikehendaki mengikuti beberapa peraturan mudah:

  • 72 jam sebelum manipulasi, anda harus mengikuti diet: anda tidak boleh makan makanan berlemak, goreng, masin dan pedas, minuman beralkohol juga dilarang;
  • disyorkan untuk mengekalkan keseimbangan air yang optimum di dalam badan, dan untuk ini perlu minum sekurang-kurangnya dua liter air minum yang bersih;
  • analisis darah vena dilakukan semasa perut kosong, oleh itu, sekurang-kurangnya 10 jam sebelum manipulasi, anda tidak boleh makan, minum teh, kopi dan minuman lain;
  • tidak merokok 4 jam sebelum prosedur.

Sekiranya atas sebab kesihatan pesakit wajib minum pil apa pun, perlu memberitahu doktor yang merawatnya terlebih dahulu. Sejam sebelum penghantaran bahan, disarankan untuk tidak melakukan aktiviti fizikal, dan sebelum memasuki bilik rawatan, anda harus duduk dan berehat selama 10-15 minit.

Proses analisis

Pensampelan darah vena untuk pemeriksaan serologi dilakukan pada waktu pagi. Pesakit harus tiba di makmal terlebih dahulu, dengan membawa dokumen yang diperlukan (pasport dan rujukan untuk analisis).

Pesakit ditawarkan untuk pergi ke bilik rawatan dan duduk dengan selesa di kerusi. Darah diambil dari urat yang terletak di selekoh siku, oleh itu perlu untuk membebaskan kawasan lengan bawah dan siku dari benda. Tourniquet disapu ke bahu, dan bantal diletakkan di bawah lengan. Jururawat memakai sarung tangan steril sekali pakai dan merawat tapak tusukan dengan kain kapas yang dicelup dalam disinfektan.

Algoritma untuk melakukan suntikan vena termasuk mengepam darah ke urat, kerana ini pesakit diminta untuk mengepalkan dan melepaskan kepalan tangannya beberapa kali. Dalam kes ini, kapal lebih baik dilihat dan diraba, yang memudahkan pengumpulan bahan. Jururawat kemudian memasukkan jarum jarum suntik ke dalam vena, menarik 10 mililiter darah, dan menggunakan patch bakteria ke tempat suntikan. Untuk mengelakkan pembentukan hematoma, setelah manipulasi, lengan harus dibengkokkan pada siku selama 15-20 minit.

Penyahkodan hasilnya

Untuk diagnosis yang tepat, reaksi serologi mesti diuraikan oleh pakar yang berkelayakan. Pengesanan antibodi belum menunjukkan adanya penyakit; dalam beberapa kes, peredaran imunoglobulin dalam darah adalah norma. Jadi, di dalam badan kita, antibodi IgM terhadap campak, cacar air, dan lain-lain selalu ada. Mereka adalah penanda jangkitan sebelumnya dan melindungi kita dari jangkitan semula. Oleh itu, pendaftaran keputusan ujian darah dan penyahkodan kajian serologi harus dilakukan secara individu untuk setiap pesakit..

Walau bagaimanapun, terdapat penanda serologi tertentu untuk penyakit berjangkit:

  • Pengesanan imunoglobulin kelas A ke dalam darah kepada virus atau bakteria menunjukkan proses menular akut yang berlangsung tidak lebih dari 14 hari.
  • Sekiranya imunoglobulin kelas M dijumpai dalam darah, maka diperlukan diagnostik makmal yang panjang, kerana antibodi ini adalah penanda penyakit yang lalu dan jangkitan jangka panjang..
  • Peningkatan titer antibodi 4 atau lebih kali dalam dua ujian darah berturut-turut menunjukkan adanya penyakit berjangkit.
  • Pengesanan antigen patogen menunjukkan bahawa patogen terdapat di dalam badan.

Sekiranya gambar diagnostik tidak jelas, ujian serologi berulang dilakukan atau pemeriksaan dilengkapi dengan kaedah penyelidikan lain (PCR, kultur bakteria, dll.)

Apa yang perlu dilakukan sekiranya penyakit kelamin dikesan

Sekiranya diagnostik serologi telah mengesahkan adanya STI, maka perlu segera menuju ke tahap rawatan untuk mengelakkan komplikasi dan kronik prosesnya. Pesakit harus mendaftar semula untuk berunding dengan doktor yang hadir. Dia akan menetapkan rawatan kompleks etiotropik dan akan memantau keadaan pesakit secara dinamik semasa terapi ubat.

Tajuk: Penyelidikan serologi: apakah itu, ujian darah untuk menentukan jangkitan, cara menderma dan menguraikan, kaedah reaksi untuk menentukan penyakit

Penerangan: Apa itu ujian serologi dan untuk mengenal pasti penyakit apa yang digunakannya. Bagaimana ujian darah untuk menentukan jangkitan. Cara menyiapkan, lulus dan menguraikan hasilnya setelah menerima. Kaedah untuk melakukan reaksi untuk menentukan penyakit.

Ujian darah sifilis (RW)
(Reaksi Wasserman)

Ujian darah

  • Deskripsi umum
  • Piawaian
  • Penyakit

Deskripsi umum

Reaksi Wassermann (RW) adalah reaksi imunologi paling popular yang digunakan untuk mendiagnosis sifilis sejak penemuannya pada tahun 1906. RW tergolong dalam kumpulan reaksi pengikat pelengkap (CSC) dan berdasarkan kemampuan serum darah pesakit dengan sifilis untuk membentuk kompleks dengan antigen yang sesuai. Kaedah CSC moden yang digunakan untuk mendiagnosis sifilis berbeza dengan antigennya daripada reaksi Wasserman klasik, namun istilah "reaksi Wasserman" secara tradisional dipertahankan oleh mereka.

Dalam darah orang yang dijangkiti, antibodi yang dihasilkan oleh sistem kekebalan tubuh muncul. Ejen penyebab penyakit ini, treponema pallidum (Treponema pallidum), mengandungi antigen cardiolipin, yang menyebabkan penghasilan antibodi yang ditentukan oleh RW. Reaksi Wasserman yang positif hanya menunjukkan adanya antibodi seperti itu dalam darah manusia, dan atas dasar ini, kesimpulan dibuat mengenai kehadiran penyakit.

Reaksi hemolisis adalah petunjuk hasil penyelidikan di RSC. Dua komponen terlibat dalam tindak balas: eritrosit domba dan serum hemolitik. Serum hemolitik diperoleh dengan mengimunisasi arnab dengan eritrosit domba. Ia tidak aktif dalam 30 minit pada suhu 56 ° C. Hasil RSC dinilai bergantung pada kehadiran atau ketiadaan hemolisis di tabung uji. Kehadiran hemolisis dijelaskan oleh fakta bahawa jika tidak ada antibodi sifilik dalam serum yang diuji, maka reaksi antigen-antibodi tidak berlaku, dan semua pelengkap menuju ke reaksi eritrosit-hemolysin domba. Dan jika ada antibodi spesifik, pelengkap sepenuhnya menuju ke reaksi antigen-antibodi dan hemolisis tidak berlaku.

Semua bahan untuk reaksi Wasserman diambil dalam jumlah yang sama - 0,5 atau 0,25 ml. Untuk menetapkan pelengkap dengan kuat pada kompleks tertentu, campuran serum ujian, antigen dan pelengkap diletakkan dalam termostat pada suhu 37 ° selama 45-60 minit. (I fasa reaksi), setelah itu sistem hemolitik diperkenalkan, yang terdiri dari eritrosit domba dan serum hemolitik (fasa II reaksi). Kemudian tiub dimasukkan semula ke dalam termostat selama 30-60 minit sebelum bermulanya hemolisis dalam kawalan, di mana antigen diganti dengan garam, dan garam ditambahkan sebagai ganti serum ujian. Antigen untuk reaksi Wasserman dilepaskan siap pakai dengan petunjuk titer dan kaedah pencairan.

Positif maksimum tindak balas Wasserman biasanya dilambangkan dengan bilangan salib: ++++ (tindak balas positif tajam) - menunjukkan kelewatan lengkap dalam hemolisis; +++ (reaksi positif) - sesuai dengan kelewatan hemolisis yang signifikan, ++ (reaksi positif lemah) - bukti kelewatan separa dalam hemolisis, + (reaksi ragu) - sepadan dengan sedikit kelewatan hemolisis. RW negatif dicirikan oleh hemolisis lengkap di semua tabung uji.

Walau bagaimanapun, kadang-kadang hasil positif palsu juga mungkin berlaku - ini disebabkan oleh fakta bahawa kardiolipin terkandung dalam sejumlah jumlah dalam sel tubuh manusia. Sistem kekebalan tubuh manusia tidak membuat antibodi terhadap kardiolipin "sendiri", tetapi ada pengecualian terhadap peraturan ini, kerana reaksi Wasserman positif berlaku pada orang yang sihat sepenuhnya. Ini sering diperhatikan selepas penyakit virus dan lain-lain yang teruk - radang paru-paru, malaria, penyakit hati dan darah, semasa kehamilan, iaitu pada saat-saat kelemahan imuniti yang serius.

Sekiranya doktor mengesyaki pesakit mempunyai hasil positif palsu untuk reaksi Wasserman, maka dia dapat memberikannya sejumlah kajian tambahan, yang biasanya digunakan dalam diagnosis penyakit kelamin..

Penyakit dan kes di mana doktor mungkin menetapkan ujian darah untuk RW

  • Sifilis.
  • Sifilis yang disyaki pada orang yang bersentuhan dengan pesakit sifilis.
  • Kehamilan.
  • Ketagihan dadah.
  • Pengguguran.
  • Demam disertai dengan peningkatan kelenjar getah bening serantau.
  • Lawatan awal ke klinik.
  • Kemasukan ke hospital untuk mendapatkan rawatan.
  • Rawatan di hospital psikiatri atau neurologi.
  • Sumbangan darah, tisu, sperma dan rahsia badan lain.
  • Bekerja di sektor perkhidmatan, perdagangan, rawatan perubatan, bidang sosial dan pendidikan.

Menjalankan prosedur lulus ujian darah untuk RW

Darah pada RW hanya didermakan semasa perut kosong. Makanan terakhir mestilah tidak lebih dari 6 jam sebelum ujian. Pakar kesihatan duduk pesakit atau meletakkannya di sofa dan mengambil 8-10 ml darah dari urat ulnar.

Sekiranya analisis diperlukan untuk bayi, maka pagar dilakukan dari vena kranial atau jugular.

Persiapan dengan penghantaran ujian darah untuk RW

Anda harus berhenti minum alkohol 1-2 hari sebelum ujian. Ia juga tidak digalakkan untuk makan makanan berlemak - mereka boleh memutarbelitkan hasilnya. Semasa membuat persiapan untuk analisis, anda harus menahan diri daripada mengambil ubat digitalis.

Kontraindikasi

Hasil analisis akan salah sekiranya:

  • pesakit mengalami peningkatan suhu badan,
  • seseorang sakit dengan penyakit berjangkit atau baru sahaja menghidapnya,
  • seorang wanita mempunyai tempoh haid,
  • hamil pada minggu-minggu terakhir sebelum melahirkan anak,
  • 10 hari pertama selepas melahirkan anak,
  • 10 hari pertama kehidupan bayi.

Tafsiran hasil analisis

Pada sifilis primer, reaksi Wasserman menjadi positif pada 6-8 minggu penyakit ini (dalam 90% kes), sementara dinamika berikut diperhatikan:

  • pada 15-17 hari pertama selepas jangkitan, reaksi pada kebanyakan pesakit biasanya negatif;
  • pada minggu ke-5-6 penyakit ini, pada kira-kira 1/4 pesakit, reaksi menjadi positif;
  • pada 7-8 minggu penyakit, RW menjadi positif pada kebanyakan.

Pada sifilis sekunder, RW sentiasa positif. Bersama dengan reaksi serologi lain (RPHA, ELISA, RIF), ini bukan sahaja memungkinkan untuk mengenal pasti kehadiran patogen, tetapi juga untuk mengetahui jangka masa jangkitan.

Dengan perkembangan jangkitan sifilik pada minggu ke-4 penyakit ini, setelah bermulanya sifiloma primer, reaksi Wasserman berubah dari negatif ke positif, tetap berlaku pada masa sifilis berulang sekunder segar dan sekunder. Dalam tempoh sekunder yang terpendam dan tanpa rawatan, RW dapat berubah menjadi negatif sehingga dengan permulaan sifilis berulang klinikal, ia kembali menjadi positif. Oleh itu, dalam tempoh sifilis yang terpendam, reaksi Wasserman negatif tidak menunjukkan ketiadaan atau penyembuhannya, tetapi hanya berfungsi sebagai gejala prognostik yang baik..

Pada lesi aktif sifilis tempoh tersier, RW positif berlaku pada kira-kira 3/4 kes. Apabila manifestasi aktif sifilis tempoh tersier hilang, ia sering berubah menjadi negatif. Dalam kes ini, reaksi Wasserman negatif pada pesakit tidak menunjukkan bahawa mereka tidak mengalami jangkitan sifilik..

Pada sifilis kongenital awal, RW positif dalam hampir semua kes dan merupakan kaedah yang berharga untuk mengesahkan penyakit ini. Dengan sifilis kongenital akhir, hasilnya sesuai dengan yang diperoleh dalam tempoh tersier sifilis yang diperoleh.

Kepentingan praktikal yang sangat penting adalah kajian reaksi Wasserman dalam darah pesakit sifilis yang menjalani rawatan. Pada beberapa pesakit, walaupun terdapat terapi anti-sifilitik yang kuat, reaksi Wasserman tidak berubah menjadi negatif - ini adalah sifilis seroresistant. Dalam kes ini, tidak masuk akal untuk menjalankan terapi anti-syphilitic tanpa henti, mencapai peralihan RW positif ke negatif..

Dari perkara di atas, ini menunjukkan bahawa reaksi Wasserman negatif tidak selalu menjadi tanda tidak adanya jangkitan sifilik di dalam badan..

Reaksi Wasserman positif mungkin terjadi pada orang dengan sejumlah penyakit dan keadaan lain yang tidak berkaitan dengan sifilis: tuberkulosis, lupus eritematosus sistemik, penyakit darah (leukemia), kusta, pemphigus, leptospirosis, neoplasma malignan, tifus, demam merah, penyakit beriberi, sakit tidur, semasa kehamilan, sebelum atau setelah melahirkan, haid, setelah anestesia, setelah minum alkohol, pada penyalahgunaan dadah, mengambil makanan berlemak, ubat-ubatan, pengenalan sera asing. Dalam kes sedemikian, kaedah lain digunakan untuk menjelaskan diagnosis (RPGA, ELISA, RIF). Reaksi Wasserman positif yang tidak spesifik dalam malaria sangat khas, terutamanya semasa tempoh serangan. Oleh itu, jika RW positif pada seseorang tanpa manifestasi klinikal sifilis dan menafikan jangkitan sifilik, malaria harus dipertimbangkan.

Semua perkara di atas menunjukkan bahawa hasil positif dari reaksi Wasserman belum menjadi bukti tanpa syarat adanya jangkitan sifilik..

Pemulihan selepas ujian

Setelah menjalani ujian darah, doktor mengesyorkan diet yang betul dan seimbang, serta cairan sebanyak mungkin. Anda dapat teh dan coklat suam. Adalah berguna untuk menahan diri daripada melakukan aktiviti fizikal dan jangan minum alkohol..

Piawaian

Biasanya, hemolisis harus diperhatikan dalam darah - ini dianggap sebagai reaksi negatif terhadap sifilis (reaksi Wasserman adalah negatif). Sekiranya tidak ada hemolisis, tahap tindak balas dinilai, yang bergantung pada tahap penyakit (ditandakan dengan tanda "+"). Perlu diketahui bahawa 3-5% orang yang sihat sempurna mungkin mempunyai reaksi positif yang salah. Pada masa yang sama, pada 15-17 hari pertama setelah jangkitan, reaksi pada orang sakit boleh menjadi negatif-palsu..

Penyakit yang mana doktor boleh memerintahkan ujian darah untuk sifilis (RW)

  1. 1. Sifilis

  • facebook
  • twitter
  • odnoklassniki
  • vkontakte
  • Youtube
  • mel

  • Diagnosis dalam talian
    © LLC "Sistem Perubatan Pintar", 2012-2020.
    Hak cipta terpelihara. Maklumat laman web dilindungi secara sah, penyalinan dihukum oleh undang-undang.

    Penempatan iklan, kerjasama: [email protected]

    Laman web ini tidak bertanggungjawab terhadap kandungan dan ketepatan kandungan yang disiarkan oleh pengguna di laman web ini, ulasan pelawat laman web. Bahan laman web hanya untuk tujuan maklumat dan maklumat. Kandungan laman web ini bukan pengganti nasihat perubatan, diagnosis dan / atau rawatan profesional. Pengambilan ubat sendiri boleh membahayakan kesihatan!

    Ujian darah serologi

    Apa itu ujian darah serologi?

    Objek serologi - antigen dan antibodi

    Ujian serologi (SI) didasarkan pada kemampuan antigen dan antibodi untuk saling mengikat. SI membolehkan anda mengenal pasti kehadiran virus atau bakteria tertentu secara tepat pada pesakit, kumpulan darah dan rhesus, kereaktifan badan terhadap antibiotik, penyakit autoimun, gangguan hormon, kekhususan protein individu, untuk menentukan keberkesanan terapi.

    Sistem kekebalan tubuh melawan mikrob patogen (antigen) yang memasuki tubuh dengan bantuan antibodi, sambil mewujudkan jenis pertahanan tersendiri terhadap setiap virus, parasit atau bakteria.

    Keupayaan sistem imun menghasilkan bahan khas yang meneutralkan zarah berbahaya telah diketahui oleh saintis sejak sekian lama. Tetapi dapat dilihat reaksi antigen-antibodi dalam keadaan makmal hanya pada akhir abad ke-19. Didapati bahawa akibat pembentukan bundel, kompleks mengendap, membentuk serpihan atau kekeruhan. Reaksi seperti itu disebut penyatuan dan pemendakan. Pada abad ke-20, serologi, sains sifat-sifat serum, berkembang pesat, kaedah diagnostik baru berdasarkan reaksi antigen-antibodi ditemui. Hari ini, terdapat banyak cara untuk mengenal pasti kompleks imun, dan SI adalah kaitan yang sangat diperlukan dalam diagnostik, rawatan, dan pembuatan ubat-ubatan dan vaksin baru..

    Petunjuk untuk analisis.

    Penyelidikan serologi digunakan secara meluas dalam bidang obstetrik

    Kajian serologi menemani orang moden sepanjang hidupnya. Ujian pertama untuk mengesan antibodi tertentu dijalankan ketika bayi masih dalam kandungan. Seorang wanita hamil menderma darah untuk pelbagai SI untuk menentukan kemungkinan konflik Rh atau jangkitan yang boleh membahayakan janin hamil. Semasa anak dilahirkan, ujian serologi diharapkan dapat mendiagnosis penyakit kongenital. Selepas itu, ujian diambil kerana alasan berikut:

    • jangkitan virus, bakteria, parasit;
    • pengenalpastian aktiviti, tahap perkembangan penyakit;
    • patologi hormon;
    • kemandulan;
    • penyakit autoimun;
    • penyakit metabolik;
    • alahan;
    • penyakit onkologi;
    • perancangan kehamilan, tempoh kehamilan, patologi wanita hamil;
    • pengenalpastian faktor reumatoid;
    • penentuan kumpulan darah dan faktor Rh;
    • keberkesanan terapi untuk pelbagai penyakit;
    • kecekapan vaksinasi;
    • tempoh pra operasi dan pasca operasi, jika perlu untuk menilai tahap beberapa antibodi;
    • kajian keadaan imun badan.

    Persediaan untuk penyelidikan.

    Sebaiknya batalkan pengambilan ubat pada malam sebelum ujian.

    Oleh kerana kajian serologi merangkumi pelbagai ujian, dalam setiap kes tertentu, persiapan tertentu mungkin diperlukan, tetapi ada peraturan umum untuk lulus ujian serologi:

    • Sehari sebelum kajian, anda harus menghadkan diet berlemak dan goreng, kecuali alkohol.
    • Makanan terakhir harus disiapkan 10 hingga 12 jam sebelum analisis.
    • Pada hari pendermaan darah, anda tidak boleh minum kopi, teh atau minuman lain. Anda boleh minum sedikit air bersih.
    • Ubat dikecualikan sebelum analisis. Sekiranya mustahil untuk membatalkan penerimaan, anda mesti memberikan senarai lengkap ubat kepada doktor, termasuk vitamin, pil perancang.
    • Semua kajian atau prosedur perubatan lain dilakukan selepas SI.
    • Dianjurkan untuk berhenti merokok 12 jam sebelum mengambil sampel darah.
    • Pada hari sebelumnya, tekanan fizikal dan emosi harus dielakkan, dan sebelum kajian, disarankan untuk duduk selama 15 minit dalam keadaan rehat sepenuhnya..
    • SI diresepkan pada waktu pagi dan diberikan semasa perut kosong.

    Kaedah ujian serologi.

    Pelbagai kaedah boleh digunakan dalam serologi

    Semua kaedah untuk penentuan kompleks antigen-antibodi (Ag-Ab) didasarkan pada penggunaan Ag atau Ab yang diketahui dalam pencarian yang tidak diketahui. Sekiranya perlu untuk mengesan Ar, diperlukan sera imun diagnostik dengan kandungan Ab tertentu. Sekiranya tujuan SI adalah untuk mengesan Ab, diagnostik digunakan - penggantungan yang mengandungi Ag tertentu.

    Ujian serologi dapat menggambarkan hasil kualitatif atau kuantitatif. Dalam kajian kualitatif, hasilnya boleh menjadi negatif atau positif, iaitu unsur yang diinginkan dijumpai atau tidak. Jumlah kuantitatif dinyatakan sebagai nilai berangka atau dengan tanda "+" (biasanya dari satu hingga empat).

    Hemaglutinasi tidak langsung adalah salah satu kaedah diagnostik

    Kaedah penyelidikan serologi:

    • Pengagregatan. Pengikatan Ab dengan Ar, diikuti dengan pembentukan serpihan atau sedimen. Reaksi langsung, tidak langsung, terperinci, petunjuk digunakan untuk mengesan antibodi dalam serum.
    • Hemagglutination. Erythrocytes dengan Ag atau Ab yang diserap di atasnya digunakan, yang terpaku pada Ab dan Ar yang sesuai. Kompleks yang terbentuk jatuh dalam bentuk sedimen kerang.
    • Kerpasan. Pembentukan kompleks Ag-Ab dengan pemendakan berikutnya dalam bentuk kekeruhan, disebut endapan.
    • Penggabungan. Pengesanan Ag dengan bantuan Ab yang diserap pada protein sel staphylococcal.
    • Perencatan hemagglutination. Antibodi anti-serum menekan antibodi virus, akibatnya, virus kehilangan kemampuannya untuk mematuhi eritrosit.
    • Reaksi Coombs tidak langsung. Ab ke permukaan Ag eritrosit ditentukan.
    • Kerpasan cincin. Ia dilakukan berdasarkan serum imun dengan lapisan Ag larut.
    • Imunodiffusi radial berganda. Reaksi dibuat berdasarkan penyebaran komponen antiserum dan Ag dalam sumur agar atau agarosa.
    • Melengkapkan reaksi mengikat. Hubungan antara Ag dan Ab disertai dengan penjerapan pelengkap; eritrosit domba dan Ab kepada mereka dalam komposisi serum hemolitik digunakan sebagai petunjuk.
    • Peneutralan. Berdasarkan peneutralan agen virus dengan antibodi.
    • Reaksi berdasarkan pelabelan Ab dan Ar dengan komposisi pendarfluor atau enzim - kaedah immunofluorescent (RIF) dan imunosorben berkait enzim (ELISA).

    Kaedah imunofluoresensi.

    "Cahaya" dalam mikroskop medan gelap

    Kaedah ini berdasarkan penggunaan Ab yang berlabel bahan pendarfluor. Selalunya, fluorescein isothiocyanate digunakan sebagai label, yang mempunyai cahaya hijau pada sinar ultraviolet. Hasil analisis dinilai berdasarkan tahap kecerahan cahaya. Kaedah penentuan manual dapat digunakan dengan menggunakan mikroskop pendarfluor, mikroskop optik dengan lampiran cahaya, dan juga kaedah automatik menggunakan sitometer mikrocip, sitometer aliran atau mikroskop pendarfluor robotik..

    RIF dijalankan dengan kaedah langsung dan tidak langsung. Kaedah langsung bermaksud pengikatan langsung Ar yang diserap ke label Ab. Kaedah tidak langsung melibatkan penggunaan Ab yang tidak berlabel untuk mengikat Ar, dan kemudian penambahan Ab berlabel, yang mengelakkan reaksi tidak spesifik.

    Ujian imunosorben berkait.

    Immunoassay sebagai kaedah diagnosis serologi

    ELISA berdasarkan pengenalpastian kompleks Ag-Ab dengan melabel salah satu komponen. Sebagai label, pelbagai enzim digunakan, yang membentuk warna akibat reaksi enzimatik. Terdapat pelbagai kaedah ELISA, ia boleh dikelaskan sebagai kaedah homogen dan heterogen..

    Homogen bermaksud bahawa semua langkah tindak balas berlaku dalam larutan.

    Kaedah heterogen meliputi pemisahan fasa menggunakan media pepejal.

    Kaedah homogen-heterogen didasarkan pada fakta bahawa kompleks Ar-Ab terbentuk dalam larutan, dan kemudian fasa pepejal digunakan untuk pemisahan..

    Terdapat banyak variasi kaedah ELISA, beberapa di antaranya ditunjukkan di bawah..

    1. Kaedah sandwic. Penyelesaian dengan Ar ditambahkan ke Ab yang tidak bergerak, setelah pembentukan kompleks, pembawa dicuci dari komponen yang berlebihan dan ditandai Ab ditambahkan. Akibatnya, Ar terperangkap, tidak bergerak dan diberi label dengan Ab, oleh itu nama kaedahnya..
    2. ELISA tidak langsung tidak kompetitif. Serum ujian dengan Ab ditambahkan ke Ar yang tidak bergerak. Apabila kompleks terbentuk, kelebihan Ab dibasuh dan ditandai Ab ditambahkan, yang dapat mengikat kompleks kekebalan tubuh yang melekat pada permukaan sumur..
    3. ELISA langsung yang kompetitif. Serum ujian dan konjugasi yang mengandungi label berlabel Ab ditambahkan ke Ag yang tidak bergerak. Beberapa jenis kompleks Ag-Am terbentuk: dengan label Ab dan Ab yang tidak bertanda, yang bersaing satu sama lain untuk hubungan dengan Ar.

    Apa yang dijangkiti oleh ujian serologi yang dijangkiti.

    Diagnosis serologi membolehkan anda mengenal pasti patogen

    Sekiranya pesakit mempunyai gejala tertentu atau kajian lain menunjukkan penyakit, ujian serologi ditetapkan.

    Ujian serologi digunakan untuk mendiagnosis jangkitan berikut:

    • virus hepatitis A, B, C, D, E;
    • sifilis;
    • HIV;
    • herpes;
    • sitomegalovirus;
    • rubela;
    • campak;
    • beguk;
    • Epstein-Barr;
    • Helicobacter;
    • klamidia;
    • mycoplasma;
    • toksoplasma;
    • lamblia;
    • helminths;
    • ureaplasma;
    • parvovirus;
    • virus cacar air;
    • virus ensefalitis bawaan kutu;
    • Virus denggi;
    • batuk rejan;
    • borrelia;
    • legionella.

    Kelebihan kaedah penyelidikan serologi dalam diagnosis jangkitan.

    Diagnostik serologi - cepat dan berpatutan

    Ujian darah

    Pada awal abad ke-20, ahli imunologi Jerman, August Wassermann menemui reaksi serologi, yang masih digunakan untuk mendiagnosis sifilis dan menanggung namanya dalam bentuk singkatan RW. Ujian darah untuk reaksi Wasserman termasuk dalam senarai kajian wajib yang dilakukan untuk wanita hamil dan sebelum prosedur pembedahan.

    Ciri-ciri reaksi Wasserman

    Apa jenis analisis yang dijelaskan dari sudut imunologi. Kajian ini dijalankan dengan kaedah RSK - reaksi pengikatan pelengkap. Pelengkap adalah sekumpulan protein khusus yang terlibat dalam lata tindak balas imun yang kompleks. Mereka adalah sebahagian daripada kekebalan semula jadi dan diperolehi. Sistem pelengkap tidak aktif sehingga diaktifkan oleh protein asing yang dihasilkan oleh mikroorganisma menyerang.

    Jalan pengaktifan klasik berlaku selepas bersentuhan dengan bakteria. Permukaannya mempunyai protein antigennya sendiri. Mereka asing bagi tubuh manusia; sebagai tindak balas, protein antibodi dihasilkan. Pelengkap diperlukan untuk merangsang antibodi, dan setelah pembentukan kompleks dengan antigen, mikroorganisma dapat dilihat oleh sel makrofag imun. Mereka menyerap bakteria dan mempromosikan penyembuhan.

    Apabila dijangkiti treponema pucat, agen penyebab sifilis, antibodi terbentuk di dalam badan, yang bertahan lama. Dengan kepekatan mereka, anda dapat menentukan fasa penyakit ini, yang ditunjukkan oleh ujian darah RW.

    Analisis Wasserman memerlukan 5 komponen:

    • antigen yang didiagnosis;
    • antibodi diagnostik;
    • antigen penunjuk - eritrosit domba;
    • antibodi penunjuk - hemolysin arnab;
    • pelengkap.

    Semasa pengaturan reaksi, 2 sistem antigen-antibodi diperlukan, salah satunya adalah petunjuk, dan yang kedua adalah spesifik. Biasanya, interaksi antigen dan antibodi disertai dengan pengikatan pelengkap, sementara kompleks terbentuk yang tidak dapat dilihat secara visual. Oleh itu, sistem hemolitik penunjuk diperlukan. Serum memekatkan eritrosit, menjadikannya sensitif terhadap tindakan pelengkap. Oleh itu, dengan adanya, hemolisis berlaku - pembusukan sel darah merah, penyelesaiannya berwarna.

    Tafsiran hasil ujian darah RW berdasarkan keparahan hemolisis. Sekiranya penyelesaiannya tetap pada keadaan telus asalnya, maka semua pelengkap telah terikat pada sistem tertentu. Ini adalah petunjuk penampilan kompleks antigen-antibodi, yang menunjukkan bahawa terdapat antigen sifilis dalam serum darah, dan antibodi telah berkembang di dalam tubuh. Hasil ini positif.

    Sekiranya tidak ada antibodi khusus untuk antigen dalam darah, kompleksnya tidak terbentuk, dan pelengkap tidak diaktifkan dan tetap bebas. Ia mengikat protein penunjuk, menyebabkan hemolisis eritrosit dan campuran dalam tabung uji menjadi merah, yang bermaksud ujian darah RW negatif.

    Ujian darah RW dilakukan di makmal dalam keadaan steril. Bahan biologi yang digunakan dan darah pesakit menjalani persiapan menyeluruh, bahan-bahan tersebut ditetrasi dalam pelbagai nisbah dengan pelengkap, menambahkan 0,5 hingga 0,05 ml protein ini. Mengikut intensiti tindak balas di setiap tabung uji, hasil tindak balas dinilai.

    Kajian yang disyorkan untuk siapa?

    Sifilis adalah jangkitan kelamin yang berbahaya. Selepas jangkitan, gejala pertama sering tidak disedari. Ulser muncul di tempat penembusan patogen. Pada wanita, mereka boleh muncul di vagina, di serviks, di rektum, atau di mulut. Mereka tidak disertai dengan rasa tidak selesa, sakit atau keputihan..

    Sekiranya patogen terdapat pada kulit pangkal paha, labia atau perineum, maka sifiloma dilokalisasi di tempat yang sama. Ulser tidak disertai dengan gatal-gatal, tidak terkelupas dan hilang sendiri tanpa jejak. Tidak ada bekas luka atau pigmentasi di tempat mereka. Oleh itu, orang tidak pergi ke doktor..

    Oleh itu, ujian darah ekspres wajib untuk RW telah diperkenalkan secara undang-undang, yang dilakukan dalam situasi berikut:

    • semua wanita hamil semasa pendaftaran, serta tidak lama sebelum melahirkan;
    • sebelum prosedur invasif, operasi pembedahan, termasuk prosedur invasif minimum;
    • semasa peperiksaan profesional wajib semasa bekerja, dan juga peperiksaan tahunan.

    Pada wanita hamil, pemeriksaan dapat dilakukan tambahan pada pertengahan masa kehamilan, yang berkaitan dengan keanehan pembentukan antibodi. Sekiranya seorang wanita dijangkiti treponema tidak lama sebelum kehamilan atau pada peringkat awal, sistem imun tidak akan mempunyai masa untuk bertindak balas, analisisnya akan negatif.

    Pakar sakit puan akan merujuk anda ke RW jika wanita yang diperiksa menunjukkan ulser yang tidak menyakitkan pada alat kelamin, kelenjar getah bening inguinal yang membesar. Ahli dermatologi atau ahli terapi akan merujuk kepada kajian untuk pesakit yang mengadu kelenjar getah bening dan ulser genital yang membesar, serta kemunculan ruam pucat pada badan. Pemeriksaan diri disyorkan untuk melakukan hubungan seksual secara kasual, tetapi tidak lebih awal dari 3-4 minggu setelah diduga dijangkiti. Ini disebabkan oleh kekhasan tindak balas imun dan tempoh inkubasi treponema..

    Ciri-ciri perjalanan sifilis dan pembentukan antibodi

    Sifilis merujuk kepada jangkitan kelamin, jangkitan berlaku apabila rembesan dari saluran kemaluan orang sakit bersentuhan dengan orang yang sihat. Untuk pengenalan treponema, cukup untuk mendapatkannya pada kulit, jadi unsur-unsur utama sering muncul di sekitar dubur, pada membran mukus mulut dan di tempat lain di mana kontak berlaku.

    Tempoh inkubasi boleh berlangsung dari seminggu hingga 190 hari dan bergantung pada ciri individu sistem imun. Ini dipendekkan pada wanita yang dijangkiti secara serentak dari dua sumber, tetapi dapat meningkat jika pada tahap pembiakan patogen, antibiotik penyakit berjangkit lain dirawat.

    Dari saat muncul chancre keras, sifilis primer bermula. Rata-rata, ia berlangsung selama 6-7 minggu dan dibahagikan kepada 2 tempoh:

    • seronegative - ujian darah untuk RW, dilakukan dengan kaedah mikro, dan jenis reaksi lain akan menjadi negatif;
    • seropositif - reaksi Wasserman menjadi positif, berlaku 3-4 minggu selepas munculnya chancre yang keras.

    Oleh itu, ketika memeriksa pesakit dengan sifilis primer yang disyaki, atau hard chancre, RW negatif adalah alasan untuk mengulangi analisis setelah beberapa minggu. Secara retrospektif, adalah mungkin untuk menetapkan resep jangkitan, menelusuri hubungan seksual atau mencari pasangan seksual yang menjadi sumber jangkitan.

    Pembahagian ke dalam periode seronegatif dan seropositif jarang digunakan, kerana kaedah diagnostik moden telah muncul, di mana patogen, DNA atau antibodi dapat dikesan dalam beberapa minggu setelah jangkitan.

    Sifilis sekunder berkembang 6-7 minggu selepas primer. Ejen penyebab secara hematogen menyebar ke seluruh badan, mempengaruhi organ dalaman, dan ruam muncul di kulit. Tempoh ini terbahagi kepada tiga yang lain:

    • awal, atau segar - ruam utama pada kulit, antibodi telah dikembangkan di dalam badan;
    • berulang - ruam muncul lagi kerana kelemahan pertahanan imun;
    • laten - penyakit ini menjadi bentuk pendam, yang tidak muncul secara luaran.

    Sifilis tersier berkembang setelah bertahun-tahun kewujudan penyakit ini tanpa rawatan. Pada masa kini, kerana penggunaan antibiotik dan diagnostik umum yang meluas, sangat jarang berlaku. Ia dicirikan oleh kerosakan pada sistem saraf, tulang, tulang rawan, organ dalaman.

    Pembentukan antibodi berlaku secara berperingkat. Pada peringkat awal penyakit, IgA muncul, setelah munculnya chancre keras, IgM dijumpai, dan setelah beberapa lama IgG. Keanehan perjalanan penyakit ini adalah bahawa pada sifilis tersier, tindak balas imun menjadi sangat lemah dan antibodi mungkin tidak dapat dikesan dalam analisis RW.

    Bagaimana persediaan untuk kajian dan apa yang mempengaruhi ketepatan analisis

    Sebelum menjalani ujian, anda perlu mendapatkan rujukan daripada doktor anda. Kajian ini tidak dilakukan secara anonim, kerana sifilis adalah penyakit yang memerlukan hubungan seksual wajib dan rawatan pasangan seksual. Ini adalah langkah pencegahan untuk menghentikan penyebaran penyakit ini..

    Tidak diperlukan persediaan khas untuk analisis. Untuk mengesan antibodi, tidak masalah sama ada darah diambil semasa perut kosong atau tidak, tetapi doktor mengesyorkan agar tidak makan pada waktu pagi, dan menyerah alkohol dan makanan berlemak pada waktu petang. Ini merangsang hati, pelepasan hempedu ke dalam lumen usus, dan peningkatan lipid darah. Semasa mencuba mendapatkan serum, chyleis akan dijumpai, yang tidak membenarkan analisis.

    Semasa mengandung, seorang wanita juga tidak digalakkan makan, tetapi dibenarkan minum air. Sekiranya keadaan kelaparan tidak dapat ditoleransi, perlu membawa gula-gula atau coklat ke klinik untuk dimakan sebaik sahaja menderma darah.

    Pengumpulan bahan biologi

    Untuk ujian RW klasik, darah vena mesti didermakan. Selalunya ia diambil dari selekoh siku, tetapi kapal lain yang boleh diakses juga dibenarkan. Urat dari mana darah diambil diperah awal dengan triket di atas tempat tusukan. Pesakit diminta untuk mengepalkan dan melepaskan kepalan tangan untuk meningkatkan aliran darah dari arteri. Pembantu makmal akan merawat kulit dengan larutan antiseptik dan menarik 5-10 ml darah ke dalam picagari steril.

    Untuk penyelidikan lebih lanjut, serum diperoleh dari darah; ini mesti dilakukan secepat mungkin agar pengaktifan dan pembekuan fibrinogen tidak terjadi. Oleh itu, unsur-unsur yang terbentuk diendapkan, dan setelah penambahan ion kalsium, fibrinogen menjadi tidak aktif. Pada masa yang sama, antibodi tidak hilang di mana sahaja, jadi bahan biologi sesuai untuk analisis.

    Hasil reaksi Wasserman

    Analisis RW mengambil masa dalam sehari. Kaedah penyelidikan moden yang secara beransur-ansur menggantikan reaksi Wasserman dari segi kesediaan masa lebih kurang sama. Tetapi kaedah penyelidikan lain memberikan hasil yang tepat pada tahap awal penampilan antibodi atau memungkinkan untuk mengenal pasti DNA patogen, oleh itu darah di RW kurang diambil.

    Semasa pemeriksaan rutin sebelum operasi, perlu diambil kira berapa lama ujian darah untuk RW berlaku, sehingga pada hari kemasukan ke hospital Anda tidak perlu mengulang pemeriksaan dan menunggu hasilnya. Ujian ini sah selama 2 bulan, begitu juga dengan ujian HIV dan hepatitis. Tetapi dalam kes di mana analisis diserahkan semasa persiapan pra operasi, doktor mengesyorkan mengambilnya satu bulan sebelum tarikh operasi atau manipulasi yang diharapkan, sehingga, jika hasilnya positif, tidak mustahil untuk menjalani rawatan dan pemeriksaan semula..

    Hasil positif

    Berapa banyak ujian darah RW dilakukan bergantung pada ciri-ciri makmal, tetapi selalunya hasilnya siap pada keesokan harinya. Kajian ini bertujuan untuk menentukan jumlah imunoglobulin kelas M dan G, hanya dalam kes ini hasil positif diperoleh. Tetapi kesimpulannya, anda dapat menemui nilai yang berbeza yang menentukan bilangan tanda "+" dalam jumlah dari 1 hingga 4. Semakin banyak nilai tambah, semakin kuat reaksi Wasserman, semakin banyak antibodi yang dimiliki pesakit.

    Di dispensari dermatovenerologic, di mana anda perlu pergi jika hasilnya positif, ujian tambahan akan ditetapkan untuk mengesahkan atau menolak diagnosis. Oleh itu, apabila menerima tindak balas positif semasa kajian awal, jangan panik, ini tidak bermaksud penyakit.

    Ujian positif untuk RW muncul dalam keadaan berikut:

    • dengan sifilis segar, atau semasa tempoh seropositif utama;
    • dengan sifilis seropositif sekunder, jika jangkitan berlaku lebih dari 3 bulan yang lalu;
    • dengan sifilis tersier dalam tempoh seropositif;
    • jika kurang dari satu tahun berlalu sejak rawatan;
    • dengan seroresistance selepas rawatan penyakit ini.

    Ujian darah untuk RW digunakan tidak hanya untuk mendiagnosis sifilis, tetapi juga untuk sindrom antiphospholipid. Ini adalah penyakit yang paling sering terjadi pada wanita dan dicirikan oleh pembentukan antibodi terhadap fosfolipid. Mereka menyerang embrio, menyebabkan keguguran berulang dan keguguran awal secara spontan. Tetapi darah pada RW dapat disumbangkan untuk diagnosis sindrom antiphospholipid jika ketiadaan sifilis disahkan.

    Hasil negatif

    Bentuk tindak balas makmal mungkin menunjukkan bahawa hasilnya negatif, yang bermaksud tidak ada antibodi. Tetapi, memandangkan keistimewaan patogenesis penyakit dan tahap pembentukan antibodi, kesimpulan seperti itu tidak selalu menjadi petunjuk kesihatan.

    Sekiranya anda mengambil ujian dalam 3-4 minggu pertama selepas hubungan seksual, semasa jangkitan mungkin berlaku, hanya terdapat imunoglobulin kelas A di dalam badan, yang tidak dapat dikesan semasa analisis untuk RW. Pada periode seronegatif awal, ketika sudah ada gejala pertama penyakit ini, kekurangan antibodi yang diperlukan untuk hasil positif juga kurang. Oleh itu, pesakit dengan sifilis yang disyaki, tetapi hasil kajian negatif, ditetapkan ujian tambahan atau pemeriksaan semula setelah beberapa minggu..

    Hasil negatif boleh berlaku apabila seseorang telah mengembangkan tahap patologi tersier. Dalam kes ini, terdapat tanda-tanda kerosakan yang ketara:

    • sistem saraf;
    • aorta dan kapal besar yang lain;
    • saraf tunjang;
    • tulang dan otot;
    • membran mukus;
    • epidermis.

    Pesakit sedemikian mengalami ingatan, perhatian dan pemikiran. Diagnosis sifilis tersier berdasarkan keputusan ujian adalah sukar.

    Hasil palsu

    Pada orang dewasa, ujian RW yang positif tidak selalu menunjukkan jangkitan. Terdapat konsep kajian positif palsu, yang dikaitkan dengan kekhasan antibodi tindak balas silang. RW palsu dapat diperhatikan dalam keadaan berikut:

    • semasa kehamilan;
    • pada pesakit diabetes mellitus;
    • dengan batuk kering;
    • pada pesakit dengan barah;
    • mereka yang menderita alkoholisme kronik;
    • dengan mononukleosis berjangkit;
    • kerosakan hati dengan hepatitis virus;
    • dengan radang paru-paru;
    • pada pesakit dengan penyakit autoimun;
    • penagih dadah;
    • dengan gout;
    • selepas jangkitan dengan enterovirus;
    • selepas vaksinasi baru-baru ini.

    Keadaan atau penyakit ini dicirikan oleh ketegangan sistem kekebalan tubuh, pembentukan sebilangan besar antibodi yang dapat bertindak balas dengan pelengkap dalam analisis RW. Oleh itu, pesakit dengan keputusan positif palsu memerlukan ujian tambahan. Wanita hamil yang menerima RW positif diuji dengan cara yang berbeza. Kadang-kadang hasil positif palsu diperoleh apabila dijangkiti jenis treponema lain yang tidak berkaitan dengan agen penyebab sifilis.

    Kaedah penyelidikan alternatif

    Reaksi Wasserman dibaca dengan kaedah penyelidikan ketinggalan zaman, oleh itu ia jarang digunakan. Ia digantikan dengan kaedah lain yang lebih tepat, secara konvensional disebut analisis RW 2, atau kaedah ekspres. Di beberapa klinik, bentuk terus memanggil ujian sifilis RW, tanpa mengira jenis tindak balas yang digunakan.

    Semua kaedah untuk mengesan jangkitan sifilik dibahagikan kepada langsung, yang memungkinkan untuk mengesan treponema pucat, dan tidak langsung, berdasarkan bukan pada pencarian antibodi terhadap patogen. Pada peringkat awal, apabila seseorang mengalami ulserasi chancre atau ruam pada kulit, sampel dapat diperoleh dari fokus patologi. Penyelidikan boleh dilakukan dengan tiga cara:

    1. PCR - kaedah ini membolehkan anda mengesan DNA patogen, dan apabila menggunakan PCR dalam masa nyata, jumlah mikroorganisma ditunjukkan. Tetapi untuk diagnosis, cukup untuk mendapatkan pengesahan mengenai kehadiran mikroorganisma. Kajian tidak berkesan untuk sifilis tersier.
    2. Mikroskopi medan gelap bertujuan untuk mengesan treponemas langsung dalam bahan yang dikaji. Pembantu makmal dapat melihat sel mikroba spiral khas yang membuat pergerakan translasi, kebolehpercayaan kaedahnya adalah 100%, tetapi hasilnya tidak akan berfungsi jika terdapat darah, nanah dalam bahan atau keradangan yang jelas pada fokus.
    3. Ujian RIT adalah ujian biologi yang mahal, di mana haiwan makmal tercemar dengan bahan dari orang yang sakit, hasil ujian harus menunggu selama beberapa minggu, sehingga kajian ini tidak digunakan untuk pemeriksaan awal.

    Dengan perintah Kementerian Kesihatan Persekutuan Rusia, kaedah berikut mesti digunakan untuk mendiagnosis sifilis:

    1. Tindak balas mikrooreksi adalah kaedah penyelidikan termudah dan terpantas, yang terdiri dalam pembentukan kompleks kekebalan tubuh dengan antibodi dalam darah pasien, mereka mendakan dalam bentuk serpihan putih.
    2. RPHA adalah reaksi hemaglutinasi langsung, kadar sensitiviti kaedahnya adalah 100%, tetapi dalam penyakit radang mungkin ada hasil yang salah.
    3. RIF - imunofluoresensi, dilakukan dengan antibodi berlabel, dalam praktiknya ia jarang digunakan kerana kos yang tinggi.
    4. RIBT - imobilisasi treponemas pucat, kajian yang mahal, digunakan dalam kes yang jarang berlaku.
    5. ELISA adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim, kaedah diagnostik yang murah dan sangat spesifik, kadang-kadang memberikan hasil yang salah, dalam hal ini kajian kedua dilakukan.

    Senarai wajib tidak termasuk ujian imunoblot. Kaedah diagnostik digunakan dalam kes-kes yang meragukan apabila diperlukan kajian mendalam. Serangkaian reaksi berpanjangan diperlukan untuk mendapatkan hasilnya, sehingga analisis memerlukan sekitar 7 hari.

    Ujian darah RW dapat mendiagnosis sifilis dan memulakan rawatan yang digunakan untuk penisilin. Kaedah pemeriksaan ini secara beransur-ansur memperoleh watak sejarah, dan ujian ekspres moden dan cepat berlaku..